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篇1

生物藥劑學(xué)與藥物動力學(xué)是藥學(xué)專業(yè)的主要專業(yè)課程之一，作者在教學(xué)過程中從二個方面進(jìn)行了教學(xué)改革的嘗試:改革教學(xué)內(nèi)容，以實例做模板闡述課本知識;改革教學(xué)方法，以PBL法結(jié)合LBL法進(jìn)行理論教學(xué)。在進(jìn)行PBL教學(xué)嘗試過程中，學(xué)生的參與積極性高，學(xué)生的準(zhǔn)備情況各異，學(xué)生的綜合能力有所提高，取得了較好的教學(xué)效果。

關(guān)鍵詞:

生物藥劑學(xué)與藥物動力學(xué);教學(xué)改革

生物藥劑學(xué)與藥物動力學(xué)是藥學(xué)類專業(yè)本科生的主要專業(yè)課程之一。生物藥劑學(xué)是研究藥物及其劑型在體內(nèi)的吸收、分布、代謝與排泄過程，闡明藥物的劑型因素、機(jī)體生物因素和藥物治療之間相互關(guān)系的科學(xué)［1］。而藥物動力學(xué)是應(yīng)用動力學(xué)原理和數(shù)學(xué)處理方法，定量地描述藥物通過各種途徑進(jìn)入體內(nèi)的吸收、分布、代謝、排泄過程的“量時”變化或“血藥濃度經(jīng)時”變化的科學(xué)。生物藥劑學(xué)與藥物動力學(xué)是一門實踐性很強(qiáng)的課程，通過這門課的學(xué)習(xí)，要使學(xué)生具備合理設(shè)計制劑處方、科學(xué)評價藥物制劑質(zhì)量、科學(xué)制訂給藥方案等方面的基本理論知識和實驗技能，為從事制劑研究和應(yīng)用工作奠定基礎(chǔ)。

對于生物藥劑學(xué)與藥物動力學(xué)這種內(nèi)容較多的藥學(xué)主干學(xué)科課程，目前國內(nèi)的教學(xué)大多采用傳統(tǒng)的醫(yī)學(xué)教育模式，“以教師為主體，以講課為中心”，即通常所說的“l(fā)ecture－basedlearing，LBL”(以授課為基礎(chǔ)的學(xué)習(xí))。這種模式多是采取全程灌輸教學(xué)，學(xué)生始終處于消極被動地位。教學(xué)方法的改革主要是改變單一的以課堂講授為主的傳統(tǒng)教學(xué)方法，代之以行之有效的適合該門課程特點的各種教學(xué)法，使學(xué)生真正由被動接受知識變?yōu)橹鲃犹角笾R。美國許多藥學(xué)院采取了以問題為基礎(chǔ)的學(xué)習(xí)(problem－basedlearning，PBL)，使授課過程能以學(xué)生為中心，激發(fā)學(xué)生自學(xué)，從而達(dá)到獨(dú)立、發(fā)揮個性的目的。

PBL對藥學(xué)學(xué)生自主學(xué)習(xí)、自我管理、獨(dú)立思考、專題討論和分析解決問題的能力培養(yǎng)均有促進(jìn)作用。盡管我國高校的教學(xué)改革已進(jìn)行了多年，但從總體上看，目前大學(xué)的教學(xué)過程并沒有真正擺脫傳統(tǒng)教育模式的影響［2］。生物藥劑學(xué)與藥物動力學(xué)是藥學(xué)類專業(yè)本科生的主要專業(yè)課程。因此，要想很好地掌握這門課程，不僅要求老師講課生動，而且學(xué)生也要充分發(fā)揮主觀能動性，使自己參與到教學(xué)中來。因此，結(jié)合生物藥劑學(xué)中“口服藥物的吸收”這一章的教學(xué)，作者嘗試進(jìn)行教學(xué)改革，并總結(jié)了部分心得。

1從以下二個方面進(jìn)行了教學(xué)改革的嘗試

1.1改革教學(xué)內(nèi)容，以實例做模板闡述課本知識在強(qiáng)調(diào)基本原理和概念的前提下，結(jié)合老師自身的科研實踐情況，將相關(guān)的內(nèi)容補(bǔ)充到教學(xué)過程中［3］。這樣，學(xué)生既掌握了經(jīng)典的理論基礎(chǔ)，又可以將所學(xué)理論知識轉(zhuǎn)換到實踐科學(xué)中去。比如，“基因多態(tài)性與個體化給藥”章節(jié)中，作者將研究過的“CYP2D6基因多態(tài)性對藥物藥動學(xué)影響”案例給學(xué)生做一個概述，通過數(shù)據(jù)和圖片的了解，使學(xué)生更能清楚基因多態(tài)性的理論知識。這樣注重學(xué)用結(jié)合，大大吸引了學(xué)生的學(xué)習(xí)興趣，促進(jìn)了教學(xué)質(zhì)量的提高。同時要求老師有豐富的實踐和科研經(jīng)驗，能夠?qū)⒗碚摵蛯嵺`結(jié)合起來，在教學(xué)過程中引入更多的實踐和臨床實例及學(xué)科的前沿發(fā)展。對老師的自身修養(yǎng)提出了更高的要求，需要老師不斷的查閱文獻(xiàn)獲取新的信息、通過實驗和實踐將理論知識拓展到新的臺階。

1.2改革教學(xué)方法，以PBL法結(jié)合LBL法進(jìn)行理論教學(xué)對于教材較為明確的概念、理論，采用LBL教學(xué)法。將概念講解透徹，按書本上的順序循序漸進(jìn)，重點的內(nèi)容詳細(xì)講，一般的知識概述講。比如，該章中藥物的吸收機(jī)制、影響藥物的吸收因素是理論基礎(chǔ)，需要講解清楚。而其中的劑型與制劑因素是藥劑學(xué)中詳細(xì)講解的內(nèi)容，在這里就可以粗略的概述，學(xué)生通過閱讀能很快理解。如果老師仍然花很多的時間去講解這部分內(nèi)容，學(xué)生會覺得枯燥無味。對于綜合性比較強(qiáng)的部分，采用PBL教學(xué)法。比如，該章中第三節(jié)“生物藥劑學(xué)分類系統(tǒng)與口服藥物制劑設(shè)計”，這是與實踐銜接緊密的部分，在講解完基本理論后，我們進(jìn)行了一次PBL教學(xué)，題目是:×××藥物的劑型改進(jìn)。給予學(xué)生一星期的時間去查閱資料、總結(jié)、以WORD文檔或PPT的形式發(fā)給老師。然后以自薦的形式推出2個同學(xué)上臺講解，講完后其他同學(xué)提出問題或互相討論。該章中第四節(jié)“口服藥物吸收的研究方法與技術(shù)”，這是實踐性很強(qiáng)的部分，光靠老師在講臺上講解，學(xué)生未必能理解，而關(guān)于這部分內(nèi)容的文獻(xiàn)很多。因此，我們對這部分內(nèi)容也進(jìn)行了一次PBL教學(xué)，要求學(xué)生通過查閱整理文獻(xiàn)，詳細(xì)透徹了解一種口服藥物吸收的研究方法。并自薦1～2名同學(xué)上臺講解。

2在進(jìn)行PBL教學(xué)嘗試過程中，作者有很多感觸

2.1學(xué)生的參與積極性高作者和學(xué)生交流了PBL教學(xué)思想后，大部分學(xué)生肯定了這種方式，學(xué)生也希望老師不要采用“填鴨式”的教學(xué)方式。老師在上面講，學(xué)生在下面聽的教學(xué)模式不能讓學(xué)生興奮起來。以致有很多學(xué)生不上課，或者上課的時候干自己的事情:看英語、玩手機(jī)等。第一次PBL教學(xué)嘗試的時候，只有個別的同學(xué)參與進(jìn)來，他們認(rèn)真準(zhǔn)備，克服自己膽怯的心理大膽自薦上臺展示。在同學(xué)和老師的鼓勵下愉快的完成了自己的挑戰(zhàn)，之后，同學(xué)間的提問和互相討論，氣氛很輕松。第二次PBL教學(xué)嘗試的時候，同學(xué)們積極響應(yīng)，熱情很高，讓作者覺得很欣慰。有幾個同學(xué)上臺后，由于過度緊張，展示好像進(jìn)行不下去了，我們給予足夠的耐心和友好，終于順利完成。學(xué)生在獲得知識的同時，抓住機(jī)會鍛煉自己，提高各方面的能力才是大學(xué)生應(yīng)該具備的。

2.2學(xué)生的準(zhǔn)備情況各異在這次教學(xué)嘗試中，作者沒有硬性規(guī)定每個學(xué)生都必須去完成，因為作者認(rèn)為只有在自愿的前提下才能看出教學(xué)改革的利弊和學(xué)生的主動性。有很多同學(xué)通過查閱文獻(xiàn)認(rèn)真的準(zhǔn)備了PPT，特別是自薦上臺展示的同學(xué)高度認(rèn)真，完成得很好。內(nèi)容上很有條理，PPT的制作很精致。也有少數(shù)同學(xué)沒有準(zhǔn)備或應(yīng)付式的準(zhǔn)備，大段文字的拷貝，這讓我們看到傳統(tǒng)教學(xué)下的應(yīng)試態(tài)度和學(xué)生心理。

2.3學(xué)生的綜合能力有所提高作者從教學(xué)改革嘗試中體會到，教學(xué)方法的改革帶來很多的好處。比如:(1)大大地促進(jìn)學(xué)生動手查閱資料的能力:現(xiàn)在我們是網(wǎng)絡(luò)時代，隨時可以通過網(wǎng)絡(luò)去了解每一個學(xué)科的發(fā)展和動態(tài)。當(dāng)給予我們的學(xué)生一個明確的目標(biāo)去查詢的時候，就能引導(dǎo)他們對網(wǎng)絡(luò)的正確運(yùn)用，而不只是運(yùn)用網(wǎng)絡(luò)沉迷于游戲。(2)提高學(xué)生PPT制作水平:從上臺展示的學(xué)生PPT制作水平來看，有的學(xué)生的PPT有很多地方需要進(jìn)行提高，如PPT頁面的布局，字體的大小和顏色的搭配，層次的整理，還有很多同學(xué)就是大段文字的拷貝讓觀眾覺得很啰嗦。在問題討論時，作者會給同學(xué)提出這些方面的不足，為學(xué)生的畢業(yè)答辯奠定基礎(chǔ)。(3)培養(yǎng)了學(xué)生的語言表達(dá)能力:在展示的同學(xué)中，有的同學(xué)講得很有老師范，條理清楚，大方得體，經(jīng)詢問知道這樣的學(xué)生因為多次參加各種活動累積了經(jīng)驗;而有的同學(xué)是頭一次登臺，展示過程中緊張得不能繼續(xù)了，經(jīng)鼓勵和支持好不容易才熬到最后。作者認(rèn)為，如果課堂上能經(jīng)常給同學(xué)機(jī)會去展示，那么對于那些缺少鍛煉的同學(xué)是一次很好的提高。(4)增強(qiáng)了學(xué)生的自學(xué)能力:有的同學(xué)說，在準(zhǔn)備過程中，會涉及到多門學(xué)科的綜合，比如藥劑學(xué)，藥物分析，臨床藥學(xué)等。當(dāng)給學(xué)生布置一個明確的任務(wù)后，學(xué)生在查詢過程中會了解到相關(guān)的知識，擴(kuò)大了學(xué)生的知識面。最終使學(xué)生從根本上掌握了相關(guān)教學(xué)內(nèi)容，促進(jìn)了教學(xué)質(zhì)量的提高。

3展望

時下各個學(xué)校都在提出改革教學(xué)方法，將以老師為主的課堂轉(zhuǎn)換成以學(xué)生為中心的課堂。作者從實踐中也深刻體會到教學(xué)改革的必要性，“授之以魚不如授之以漁”。學(xué)生在大學(xué)過程中會接觸到很多學(xué)科的學(xué)習(xí)，如果能激發(fā)學(xué)生的學(xué)習(xí)主動性，那么他們的大學(xué)生活不會僅僅是機(jī)械地接受老師課堂所講，然后應(yīng)付期末考試之后將知識拋之腦后;學(xué)生將根據(jù)自己的興趣和愛好，挖掘?qū)W科真正的內(nèi)在，為以后的發(fā)展奠定堅實的基礎(chǔ)。

參考文獻(xiàn)

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［2］李曉娜，呂立勛．生物藥劑學(xué)與藥物動力學(xué)教學(xué)改革探討［J］．當(dāng)代教育論壇，2010(3):25－28．

篇2

關(guān)鍵詞：生物藥劑學(xué)與藥物動力學(xué)；課程改革；深入思考

中圖分類號：G642.0 文獻(xiàn)標(biāo)志碼：A 文章編號：1674-9324（2013）18-0167-02

目前我國正處在改革與發(fā)展的關(guān)鍵時期，社會由于網(wǎng)絡(luò)技術(shù)十分發(fā)達(dá)，作為現(xiàn)代大學(xué)生對知識的了解和未來的規(guī)劃都有自己的打算，加之現(xiàn)代社會商業(yè)氛圍很濃，經(jīng)濟(jì)發(fā)展較快，也增加了當(dāng)代大學(xué)生的浮躁心理，因此跟大一、大二相比，大三和大四他們已不再特別關(guān)注學(xué)習(xí)、考試分?jǐn)?shù)的高低及在班級的排名，大部分學(xué)生已缺乏學(xué)習(xí)激情，他們更關(guān)注前途和就業(yè)問題，而我們的許多專業(yè)課程主要都集中在大三和大四，因此如何提高他們學(xué)習(xí)積極性成了我們專業(yè)課老師的頭等大事。我校的辦學(xué)理念是“計量立校、標(biāo)準(zhǔn)立人、質(zhì)量立業(yè)”，在計量、質(zhì)量、檢測、標(biāo)準(zhǔn)等方面具有鮮明的辦學(xué)特色，因此我校藥學(xué)教育應(yīng)在“定量藥學(xué)”、“標(biāo)準(zhǔn)藥學(xué)”等方面有所體現(xiàn)，將數(shù)學(xué)模型理念與藥學(xué)、生物學(xué)相融合，共同促進(jìn)我校藥學(xué)科的發(fā)展，同時也豐富、完善和延伸我校的“質(zhì)量、標(biāo)準(zhǔn)”辦學(xué)理念和特色。因此，作為“定量藥學(xué)”和“計量藥學(xué)”核心課程的《生物藥劑學(xué)與藥物動力學(xué)》，教學(xué)模式必須進(jìn)行不斷改革與創(chuàng)新，增強(qiáng)學(xué)生學(xué)習(xí)的積極性，培養(yǎng)具有我校特色的藥學(xué)人才。《生物藥劑學(xué)與藥物動力學(xué)》是藥學(xué)專業(yè)一門非常重要的專業(yè)課，國內(nèi)外藥學(xué)類專業(yè)一門必修課，該門課程在我校已開設(shè)5年。本門課程主要研究藥物及其劑型在體內(nèi)的吸收、分布、代謝與排泄過程，闡明藥物的劑型因素、機(jī)體因素和藥物療效之間相互關(guān)系的科學(xué)。同時利用動力學(xué)的原理與數(shù)學(xué)處理方法，定量描述藥物通過各種途徑進(jìn)入體內(nèi)后體內(nèi)作用過程的動態(tài)變化規(guī)律的科學(xué)，為新藥設(shè)計、藥物質(zhì)量評價及指導(dǎo)臨床合理用藥提供了基本理論和基本方法。掌握本課程內(nèi)容，將為進(jìn)一步學(xué)習(xí)臨床藥代動力學(xué)及從事新劑型新制劑研發(fā)和臨床藥學(xué)工作打下堅實的理論基礎(chǔ)。傳統(tǒng)藥學(xué)主要是經(jīng)驗藥學(xué)，大多主要研究藥物的活性，偏向于定性研究。隨著社會的進(jìn)步，藥學(xué)的發(fā)展最終要走向定量藥學(xué)，以更加精確、量化的方式來研究和創(chuàng)制新藥。作為藥學(xué)專業(yè)的一門骨干課程，《生物藥劑學(xué)與藥物動力學(xué)》則主要是利用現(xiàn)代生物學(xué)和數(shù)學(xué)模型手段來開展外源化合物在生物體內(nèi)動態(tài)變化過程，對藥物在機(jī)體內(nèi)的過程進(jìn)行“量化”，以此來定量評價藥物的生物學(xué)活性及制定安全、有效的給藥方案。對于生物藥劑學(xué)和藥物動力學(xué)的教學(xué)改革和探索，目前國內(nèi)外相關(guān)高校和專業(yè)均進(jìn)行了探索。國內(nèi)有高校教師對近3-5年的藥學(xué)學(xué)生進(jìn)行了問卷調(diào)查，結(jié)果發(fā)現(xiàn)大部分學(xué)生認(rèn)為此門課程比較難學(xué)，且藥物動力學(xué)部分含有較多的高等數(shù)學(xué)公式，涉及公式推導(dǎo)、藥物動力學(xué)參數(shù)計算等內(nèi)容，而這些內(nèi)容又是大一所學(xué)內(nèi)容，同時對于高等數(shù)學(xué)本身又是生物、醫(yī)藥類專業(yè)的薄弱環(huán)節(jié)，因此如何提高這部分內(nèi)容的講解及讓學(xué)生迅速接受并將其應(yīng)用于藥物動力學(xué)課程學(xué)習(xí)是藥物動力學(xué)部分的主要問題。因此為了對此門課程教學(xué)方法進(jìn)行改革，有的高校采用優(yōu)化教法、適當(dāng)應(yīng)用PBL教學(xué)法，同時采用EXCEL等軟件編輯了不同的藥物動力學(xué)參數(shù)處理程序，讓學(xué)生進(jìn)行學(xué)習(xí)，收到很好效果。在國外的教學(xué)方面，北美和日本的藥學(xué)院非常重視調(diào)整和改革生物藥劑學(xué)與藥物動力學(xué)的教學(xué)內(nèi)容。根據(jù)筆者近5年來對該課程的教學(xué)和相關(guān)科研工作，在本門課程教學(xué)改革方面擬進(jìn)行以下改革，以期獲得良好的教學(xué)效果。

1.理論教學(xué)體系的改革與創(chuàng)新。改變傳統(tǒng)純粹的教師在上面說，學(xué)生在下面聽的說教形式，鼓勵學(xué)生自主學(xué)習(xí)、探知能力，將其研究成果以論文的形式發(fā)表，增加學(xué)生的成就感。具體可以采用如下兩種方式：首先，應(yīng)用EXEL軟件、SPSS等處理軟件，編輯體內(nèi)藥物分析中標(biāo)準(zhǔn)曲線、回收率以及精密度的計算公式，同時編輯根據(jù)血藥濃度——時間數(shù)據(jù)計算藥物動力學(xué)參數(shù)的公式，并在課堂相關(guān)章節(jié)進(jìn)行模擬演示。其次，在一些重要章節(jié)理論教學(xué)過程中，采用Seminar學(xué)術(shù)討論會的模式，讓學(xué)生利用所學(xué)文獻(xiàn)檢索知識，自己查找國內(nèi)外與本課程緊密相關(guān)的重要期刊文獻(xiàn)，分組討論，并寫出讀書報告，以此培養(yǎng)學(xué)生的閱讀能力、探索能力及寫作能力，作為學(xué)生的平時成績。

2.實踐教學(xué)體系的改革與創(chuàng)新。首先，基于校級開放實驗項目、校課外科技活動、新苗人才計劃以及學(xué)科競賽等課外實踐活動，將其中比較成熟的實驗項目編入實驗指導(dǎo)書中，同時與藥物“毒物代謝動力學(xué)”緊密結(jié)合，編撰出一部特色的、多課程聯(lián)合的實驗指導(dǎo)教程。其次，以“產(chǎn)學(xué)研項目”和“科研項目”為基礎(chǔ)，構(gòu)建緊密的實習(xí)基地，構(gòu)建“互惠互利”的長期機(jī)制。最后，積極與當(dāng)?shù)厥∈惺称匪幤繁O(jiān)督管理局、省藥師協(xié)會以及藥物不良反應(yīng)監(jiān)測中心等校外單位聯(lián)系，采取參觀、講座的形式，拓展學(xué)生的視野，明確學(xué)生將來就業(yè)方向。

3.教學(xué)方法和手段的改革。課堂教學(xué)方法和手段采用多媒體、新藥開發(fā)案例、分組討論、激勵法、強(qiáng)化訓(xùn)練等教學(xué)手段和教學(xué)方法，關(guān)鍵是要解決制作高水平的多媒體課件、視頻網(wǎng)絡(luò)課件及真實的新藥篩選、安全性評價及相關(guān)“藥害”具體案例分析。

4.課程考核體系的改革?！渡锼巹W(xué)與藥物動力學(xué)》是一門理論與實踐性很強(qiáng)的課程，而且涉及到高等數(shù)學(xué)、藥理學(xué)、藥物分析學(xué)、藥物化學(xué)、藥劑學(xué)等多學(xué)科，因此除了在理論和實踐方面加強(qiáng)改革外，在考核部分也應(yīng)建立相應(yīng)的配套體系，以此來評價教學(xué)效果。改變傳統(tǒng)的卷面成績+實驗成績+平時成績的考核模式，增加平時成績的權(quán)重，將學(xué)生制作的小軟件、綜述、實驗設(shè)計、讀書報告等內(nèi)容均作為其平時成績的一部分，激勵學(xué)生理論知識與實踐知識的有機(jī)結(jié)合。

《生物藥劑學(xué)與藥物動力學(xué)》在我校藥學(xué)專業(yè)開設(shè)已滿5年，五年來在每一屆學(xué)生的教學(xué)過程中，均對其教學(xué)內(nèi)容、教學(xué)方法進(jìn)行梳理和改進(jìn)，并對相關(guān)課程改革進(jìn)行了前期探索，收到了良好的效果，根據(jù)05-08屆藥學(xué)專業(yè)學(xué)生反饋信息的收集、整理，我校教師初步體會到了本課程在教學(xué)內(nèi)容、教學(xué)方法以及考核方式上的共性問題，準(zhǔn)備針對這些共性問題提出改進(jìn)措施，為以后課程教學(xué)改革提供參考。因此，在對該門課程教學(xué)改革進(jìn)行深入探索與思考基礎(chǔ)上，提出切實可行的改革措施和思路，并努力將改革思路付諸實施，為我校藥學(xué)專業(yè)發(fā)展提供教學(xué)思路。

參考文獻(xiàn)：

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項目資助：中國計量學(xué)院重點建設(shè)課程項目資助；中國計量學(xué)院研究生教改項目資助

篇3

摘要：本文以藥物制劑課程中的“生產(chǎn)維生素C安瓿注射液”工作任務(wù)為例，闡述行動導(dǎo)向教學(xué)的設(shè)計和實施過程。

關(guān)鍵詞 ：行動導(dǎo)向一體化教學(xué)完整工作過程藥物制劑

行動導(dǎo)向的教學(xué)策略是“完整行動”的工作過程，目的是讓學(xué)生通過工作和學(xué)習(xí)任務(wù)來獨(dú)立地獲取信息、制訂計劃、評估計劃。

一、課程設(shè)計理念

藥物制劑一體化課程的設(shè)計理念是以職業(yè)崗位標(biāo)準(zhǔn)為依據(jù)，以工作任務(wù)為構(gòu)建學(xué)習(xí)情境，以理實一體化為教學(xué)環(huán)境，利用多媒體課件、視頻技術(shù)、現(xiàn)場教學(xué)等手段，采用行動導(dǎo)向教學(xué)法進(jìn)行設(shè)計。

二、課程內(nèi)容設(shè)計

藥物制劑工所面臨的典型工作任務(wù)是生產(chǎn)不同劑型藥物，為了使教材知識與工作實際進(jìn)行無縫對接，按照能力本位的職業(yè)教育觀，將知識能力、技術(shù)能力、社會能力和方法能力作為培養(yǎng)目標(biāo)，將藥劑學(xué)、制劑設(shè)備及GMP實施等課程進(jìn)行整合，并開發(fā)出《藥物制劑一體化工作頁》。

三、教學(xué)組織與實施

以“生產(chǎn)500支（2ml/支）維生素C安瓿注射液”任務(wù)為例，把行動導(dǎo)向完整工作過程詮釋如下：資訊 （做什么？怎么做？ ）計劃 （該如何完成生產(chǎn)？在什么環(huán)境中生產(chǎn)？）決策 （計劃可行嗎？合理嗎？）實施 （注射用水的制備、安瓿的處理、配液、過濾、灌封、滅菌、檢漏、燈檢、包裝、質(zhì)量監(jiān)控操作及生產(chǎn)記錄的填寫、文件的歸檔等操作；各環(huán)節(jié)出現(xiàn)的問題及分析處理）檢查控制 （監(jiān)控自產(chǎn)產(chǎn)品質(zhì)量是否合格？ 生產(chǎn)記錄填寫是否正確？文件歸檔是否到位？）評價反饋 （總結(jié)、反饋、考核）。

具體教學(xué)組織如下。

1.教學(xué)準(zhǔn)備

在教學(xué)環(huán)境的設(shè)計上，模擬藥廠的生產(chǎn)車間設(shè)置了不同制劑的實訓(xùn)室，各實訓(xùn)室配備有多媒體教學(xué)設(shè)備；給學(xué)生分好組，7～10名學(xué)生為一個學(xué)習(xí)小組，模擬成一個生產(chǎn)隊伍；在教學(xué)前準(zhǔn)備GMP生產(chǎn)的各種文件，在每個崗位的墻上貼標(biāo)準(zhǔn)操作規(guī)程，讓學(xué)生在形象、仿真的環(huán)境中主動思考和探索。

2.情境描述、任務(wù)引入

在學(xué)習(xí)過程中，學(xué)生首先要獲得的是關(guān)于職業(yè)內(nèi)容和工作環(huán)境的感性認(rèn)識，進(jìn)而獲得與工作崗位和工作過程相關(guān)的專業(yè)知識和技能，因此首先教師要通過真實的學(xué)習(xí)情境描述把學(xué)生帶入真實的工作環(huán)境中，激發(fā)起學(xué)生的學(xué)習(xí)興趣和熱情，然后下達(dá)生產(chǎn)任務(wù)，讓學(xué)生明確任務(wù)，從中樹立學(xué)習(xí)的責(zé)任。

3.獲取資訊——接到生產(chǎn)任務(wù)，解讀相關(guān)文件

學(xué)生獲取信息正確與否，關(guān)系到任務(wù)是否能完成。在這一環(huán)節(jié)中，教師要結(jié)合多種的教學(xué)方法進(jìn)行教學(xué)，并提供技術(shù)資料（工藝規(guī)程、標(biāo)準(zhǔn)操作規(guī)程等文件）、網(wǎng)絡(luò)視頻、多媒體課件等資源，讓學(xué)生通過解讀相關(guān)生產(chǎn)文件、觀看視頻、瀏覽課件、討論、咨詢等途徑獲取生產(chǎn)的相關(guān)信息。

4.計劃生產(chǎn)——擬訂生產(chǎn)計劃方案

為學(xué)生設(shè)置好生產(chǎn)計劃方案表，從生產(chǎn)工序安排、崗位分工、操作流程、質(zhì)量安全監(jiān)控項目和監(jiān)控點、原輔材料準(zhǔn)備、生產(chǎn)設(shè)備和用具準(zhǔn)備、生產(chǎn)環(huán)境要求等方面要求學(xué)生完成擬定。在此學(xué)習(xí)和工作過程中，學(xué)生主動從各種途徑獲取相關(guān)內(nèi)容，然后派代表上臺報告本組所制訂的計劃方案，從而培養(yǎng)學(xué)生的自主學(xué)習(xí)能力、協(xié)助溝通和語言表達(dá)能力。

5.決策——計劃審定

在組內(nèi)、組間討論決策方案的可行性、合理性，教師審核方案，最后確定重新修改方案或執(zhí)行方案。

6.實施——生產(chǎn)

學(xué)生按照審核通過的生產(chǎn)方案進(jìn)行生產(chǎn)操作，把注射用水的制備、安瓿的處理、領(lǐng)取稱量物料、配液、過濾、灌封、滅菌、檢漏、燈檢、包裝等崗位進(jìn)行任務(wù)拆分，由個人完成各自任務(wù)后再相互交流，輪崗學(xué)習(xí)，鼓勵學(xué)生發(fā)揚(yáng)“傳、幫、帶”的精神，共同完成任務(wù)。

7.檢查控制——產(chǎn)品質(zhì)量監(jiān)控檢查

對于本組生產(chǎn)出來的藥品進(jìn)行質(zhì)量監(jiān)控，檢查是否存在問題。通過問題反饋，組內(nèi)討論找出解決方案，教師可充當(dāng)咨詢者、引導(dǎo)者、主持人，從而讓學(xué)生學(xué)會合作交流、溝通協(xié)助，提升他們分析和解決問題的能力。

8.評價反饋——評價產(chǎn)品質(zhì)量、工作過程、工作態(tài)度等

完成任務(wù)后，各小組展示成果，派代表上臺講述，并提出需要改進(jìn)的地方。評價階段采取過程評價與結(jié)果評價相結(jié)合，小組自評、小組互評和教師評價相結(jié)合的方式。如組間可以對pH值、裝量等項目進(jìn)行質(zhì)量評估，以此作為專業(yè)能力的考核；再如教師根據(jù)生產(chǎn)計劃方案對各組學(xué)生方法能力、社會能力做過程考核。

四、教學(xué)效果

篇4

[關(guān)鍵詞]生物藥劑學(xué)；藥物動力學(xué)；教學(xué)改革；對乙酰氨基酚；HPLC

生物藥劑學(xué)作為藥劑學(xué)的分支學(xué)科，有著很強(qiáng)的實踐性和綜合性，主要以藥動力學(xué)為研究工具和手段，研究藥物及制劑在體內(nèi)的運(yùn)動轉(zhuǎn)化過程，并著重厘清藥物因素、機(jī)體生物學(xué)因素與藥效間相互作用的科學(xué)。為準(zhǔn)確評估藥物制劑質(zhì)量、劑型開發(fā)、工藝改進(jìn)、以及臨床合理用藥的指導(dǎo)提供科學(xué)依據(jù)，從而確保用藥的安全有效[1]。其研究思路、方法與結(jié)果影響著藥學(xué)工作者的科研思維和工作方法，對提高藥物研究與臨床用藥水平起到積極推動作用。近年來，隨著生物藥劑學(xué)學(xué)科的飛速發(fā)展以及與臨床藥學(xué)、新藥研究的高度融合，以及在國家大力扶持中醫(yī)藥事業(yè)的大背景下，對中藥學(xué)專業(yè)畢業(yè)生的能力要求上也有了新的變化，為滿足社會、科學(xué)發(fā)展需要，許多高校的中藥學(xué)等相關(guān)專業(yè)相繼開設(shè)《生物藥劑學(xué)與藥物動力學(xué)》課程，并日漸提升為中藥學(xué)專業(yè)的主干課程。近幾年，為適應(yīng)大學(xué)生的發(fā)展和社會需求，我校修訂了中藥學(xué)專業(yè)培養(yǎng)方案，其中一項重要內(nèi)容就是將生物藥劑學(xué)作為中藥學(xué)本科、碩士研究生的專業(yè)選修特色課程。雖然該課程從無到有，實現(xiàn)了零的突破，但是由于課時相對較少，尤其是在實驗課時安排上更顯窘迫，為了保證在有限的時間內(nèi)更好地完成教學(xué)及實現(xiàn)實驗與理論相結(jié)合[2]，對實驗內(nèi)容進(jìn)行積極有效的改進(jìn)，受到學(xué)校和學(xué)生的廣泛好評。現(xiàn)將實驗改進(jìn)內(nèi)容和結(jié)果歸納匯總?cè)缦拢?/p>

1原實驗內(nèi)容

原實驗內(nèi)容參考林寧老師主編、由中國中醫(yī)藥出版社出版《生物藥劑學(xué)與藥物動力學(xué)》(2016年出版)中的“血藥濃度法測定口服給藥的藥動學(xué)參數(shù)與生物利用度”實驗項目[3]，其主要實驗內(nèi)容如下：1.1標(biāo)準(zhǔn)曲線的制備分別取APAP標(biāo)準(zhǔn)品制備20、40、80、120、160、200g·L-1濃度的溶液10mL，精密取1mL、0.5mL空白家兔血漿后加0.12mol·L-1的氫氧化鋇溶液3.5mL于試管中，搖勻，放置2min，再加入2%硫酸鋅溶液3.5mL，加入純化水10mL，搖勻，離心機(jī)2500rpm離心10min，取上清液3.5~4mL，即為供試品；以純化水1mL加0.5mL空白家兔血漿混勻同上操作作為參比液，采用紫外分光光度儀于245nm處測定吸收度(Absorbance，A)，以APAP濃度對A為繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線并求出回歸方程備用。1.2給藥與取樣家兔稱重。給藥前耳緣靜脈取空白血約2mL，而后家兔口服APAP片(0.5g)一片，約20mL水送服(或同服同劑量的溶液)，給藥后于0.25h、0.5h、1.0h、2h、3h、4h、5h、7h耳緣靜脈取血約2mL，置試管中。1.3血清中APAP的測定將所取血樣置37℃水浴保溫1h，取出，以3000rpm離心10min，取血清0.5mL，置10mL具塞刻度試管中，以下按“制備標(biāo)準(zhǔn)曲線”項下方法操作，并以按同步操作的空白血清樣品做參比，紫外分光光度儀λ=245nm處測定APAP含量，根據(jù)1.1獲得的標(biāo)準(zhǔn)曲線，計算血清中APAP的含量。1.4.數(shù)據(jù)處理應(yīng)用殘數(shù)法求算APAP的藥動學(xué)參數(shù)。

2實驗改進(jìn)

原實驗內(nèi)容是評定藥物制劑生物利用度的經(jīng)典方法，通過測定血藥濃度可獲得藥物在體內(nèi)的瞬時數(shù)據(jù)，相較于尿藥檢測更為理想。且采用紫外分光光度法測定APAP含量，操作簡單、結(jié)果準(zhǔn)確、專屬性也較強(qiáng)，廣泛應(yīng)用于學(xué)生的實驗中。但是，由于學(xué)生的操作熟練程度不夠，血液樣品處理時常常有血樣中的蛋白處理不夠徹底，而干擾APAP含量測定的準(zhǔn)確性；并且，采用氫氧化鋇和硫酸鋅去除蛋白的方法干擾因素較多，重現(xiàn)性較差，即使同一血液樣品，不同學(xué)生進(jìn)行處理操作，所測得的吸收度也不同；再者，我校由于《生物藥劑學(xué)與藥物動力學(xué)》課程的實驗課時安排較少，為合理安排實驗項目，我們對APAP的測定方法包括紫外分光光度法[4]和HPLC[5-6]法進(jìn)行文獻(xiàn)檢索、多因素比較衡量，通過預(yù)實驗，最終確定較為合理的給藥方法、血樣處理以及血樣中APAP的檢測方法，現(xiàn)匯總?cè)缦隆?.1HPLC條件及方法學(xué)考察由生物藥劑學(xué)興趣小組完成。2.1.1色譜條件[7]色譜柱：ODSC18柱，460*250mm，5μm；流動相：甲醇-乙酸銨溶液(0.05mol·L-1)=10∶90；檢測波長：245nm；流速：1.0mL·min-1；進(jìn)樣量：20μL。2.1.2溶液制備2.1.2.1APAP標(biāo)準(zhǔn)品溶液以流動相作溶劑配制APAP標(biāo)準(zhǔn)品儲備液1.0mg→10mL，取其0.50mL，流動相稀釋至10mL，混勻，過濾，得標(biāo)準(zhǔn)品溶液(APAP濃度：4.95μg·mL-1)。2.1.2.2樣品溶液家兔稱重，以劑量為100mg/kg灌胃給藥APAP，30min后自耳緣靜脈取血至肝素化試管中，3000rpm離心10min，取血漿0.20mL，加1.80mL流動相稀釋，混勻，0.22μm微孔濾膜過濾(下同)，作供試品溶液。2.1.2.3陰性對照溶液精密取純化水0.50mL，加空白血漿1.00mL，流動相稀釋至10mL，混勻，過濾，作為陰性對照溶液。2.1.3系統(tǒng)適用性考察分別取APAP標(biāo)準(zhǔn)品溶液、供試品溶液、陰性對照液，按照2.1.1色譜條件檢測，結(jié)果如圖1所示，儀器基線平穩(wěn)，APAP的保留時間RT=18.389min，峰形尖銳，理論塔板數(shù)高于8000，樣品的分離度高，由家兔空白血漿制備的陰性對照溶液在該位置上無干擾峰，表明該方法可用于家兔給藥后APAP血藥濃度的測定。2.1.4標(biāo)準(zhǔn)曲線量取APAP標(biāo)準(zhǔn)品儲備液1.00mL稀釋20倍，過濾，分別進(jìn)樣10、20、30、40、50μL，測定各進(jìn)樣量的APAP峰面積，以峰面積(y)對濃度(x)進(jìn)行線性回歸，制作標(biāo)準(zhǔn)曲線。得標(biāo)準(zhǔn)曲線方程y=66551.96x+236.5(r=0.9999)，線性范圍：2.475~12.375μg·mL-1。2.1.5精密度考察取2.1.2.1中的APAP標(biāo)準(zhǔn)品溶液，進(jìn)行精密度考察。結(jié)果：APAP含量的標(biāo)準(zhǔn)誤RSD%為0.22%(n=5)，顯示該臺HPLC儀器良好的精密度。2.1.6重復(fù)性考察按照2.1.2.2供試品溶液制備方法平行操作，獲得5個供試品溶液，分別測定APAP含量，并計算其標(biāo)準(zhǔn)誤RSD%為0.46%(n=5)，顯示該檢測方法的重現(xiàn)性良好。2.1.7回收率考察按照2.1.2.2方法制備APAP供試品溶液15mL，分別精密量取該供試品2.5mL，以稀釋10倍的標(biāo)準(zhǔn)品儲備液補(bǔ)充APAP含量，使之分別相當(dāng)于供試品標(biāo)示量濃度的80%、100%、120%，定容至終體積為5mL；測定溶液中APAP含量，并計算各加樣回收率。結(jié)果如表1示，其回收率的均值為103.80%，RSD%=2.70%(n=9)，表明在此檢測條件下測定APAP含量的合理性、有效性。2.2家兔給藥方法、血漿取樣及樣品處理方法家兔(雌兔應(yīng)未孕)稱重，灌胃給藥給對乙酰氨基酚片劑100mg/kg。分別于給藥前、給藥后10min、20min、30min、60min、90min、2h、3h、4h、5h、7h耳緣靜脈取血約0.8mL至肝素化EP管中。取樣期間，家兔自由進(jìn)水進(jìn)食。各血樣經(jīng)3000rpm離心10min，取上層血漿按照上述供試品溶液處理和測定方法測定APAP的含量。2.3計算藥物動力學(xué)參數(shù)以及生物利用度取該實驗學(xué)生獲得的實驗數(shù)據(jù)，求算APAP血藥濃度，以血藥濃度的對數(shù)(lgC)與時間(t)作圖，得藥時曲線。應(yīng)用殘數(shù)法求算APAP的藥動學(xué)參數(shù)，包括消除速度常數(shù)(k)、吸收速度常數(shù)(ka)、半衰期(t1/2)、表觀分布容積(V)以及峰濃度(Cmax)、達(dá)峰時間(Tmax)、藥時曲線下面積AUC和生物利用度F，結(jié)果如圖3。

3討論

生物藥劑學(xué)的實驗教學(xué)是理論教學(xué)的重要補(bǔ)充內(nèi)容，注重培養(yǎng)學(xué)生的科學(xué)態(tài)度和動腦、動手能力，也是培養(yǎng)學(xué)生綜合素質(zhì)的重要手段[8]。采用家兔血藥濃度法測定APAP血管外給藥的藥動學(xué)參數(shù)及生物利用度是中藥學(xué)專業(yè)《生物藥劑學(xué)與藥物動力學(xué)》以及碩士研究生《生物藥劑學(xué)與藥物臨床試驗》課程的主要實驗內(nèi)容之一，對于學(xué)生理解掌握藥物在體內(nèi)過程、藥動學(xué)參數(shù)意義以及在藥物臨床研究中的應(yīng)用等方面有著非常重要的指導(dǎo)意義。在該實驗項目中，家兔的采血成功與否、血樣中干擾因素去除的徹底性以及血藥濃度檢測的準(zhǔn)確性是實驗成功的關(guān)鍵因素。本文在參考相關(guān)教材、文獻(xiàn)的基礎(chǔ)上，綜合學(xué)校課程設(shè)置、實驗條件以及學(xué)生的操作水平，對家兔取血量、樣品的前處理、以及APAP的分析檢測方法進(jìn)行改進(jìn)：(1)在實驗前期，由該課程的興趣小組對APAP的HPLC檢測方法學(xué)進(jìn)行摸索、確定。制作APAP的標(biāo)準(zhǔn)曲線，求算回歸方程及相關(guān)系數(shù)并對方法學(xué)進(jìn)行考察；(2)體內(nèi)血藥濃度測定實驗由全體同學(xué)參與，分組實施，實驗內(nèi)容按照“2.家兔給藥方法、血漿取樣及樣品處理方法”進(jìn)行取樣及處理；(3)求算藥物動力學(xué)參數(shù)以及生物利用度。通過實驗數(shù)據(jù)以及以往文獻(xiàn)資料顯示，APAP屬于單室模型藥物，各實驗組以血漿中APAP濃度的對數(shù)(lgC)與時間(t)作圖，得藥時曲線。實驗結(jié)果發(fā)現(xiàn)，給藥后2h、3h、4h、5h、7h的對數(shù)濃度與時間的線性關(guān)系顯著，表明灌胃給藥對乙酰氨基酚2h后即即進(jìn)入消除相，并由該5個點獲得APAP的消除速度方程lgC=-0.174t+2.608(r=-0.990)，進(jìn)而求得10min、20min、30min、1h的殘數(shù)濃度(Cr=C外推-C實際)，利用該4個點的對數(shù)殘數(shù)濃度對時間作圖，獲得回歸方程lgCr=-0.961t+2.655(r=-0.999)。利用以上數(shù)據(jù)及方程，求算APAP的藥動學(xué)參數(shù)，如圖3。改進(jìn)后的實驗方法和以往實驗方法相比，其優(yōu)點在于：(1)采血量減少。由于采血方式為耳緣靜脈采血，血流較慢，瞬時可取血量較小，而且，在本實驗中取血時間點設(shè)計比較密集，加之學(xué)生的操作水平不高，很難在規(guī)定時間點取出足量的血液供紫外分光光度法進(jìn)行APAP的含量檢測，并且，由于多次采血，多個實驗組在2h以后幾乎無法繼續(xù)采血，導(dǎo)致實驗失敗。而改進(jìn)后的實驗取血在0.8±0.2mL即可達(dá)到檢測要求，大大降低了取血難度，保證各時間點的順利采血，從而保證圓滿實驗。(2)血樣處理簡單化。家兔取血后離心取血漿，加流動相稀釋10倍，混勻，0.22μm微孔濾膜過濾，即可。大大簡化了血樣的去除蛋白等雜質(zhì)的操作過程。(3)提高檢測結(jié)果的準(zhǔn)確度。采用HPLC方法進(jìn)行APAP的含量檢測，相對比于紫外分光光度法，測得的結(jié)果更加精確、穩(wěn)定，專屬性更強(qiáng)(結(jié)果見圖1、表1)。(4)縮短實驗學(xué)時。由于給藥和血樣處理的簡單化，并直接采用HPLC的樣品檢測批處理操作，可明顯縮短實驗時間，更加貼合我校生物藥劑學(xué)的課程設(shè)置。在以后的實驗過程，擬對以下環(huán)節(jié)進(jìn)行改進(jìn)優(yōu)化：(1)取樣時間的優(yōu)化。在保證APAP消除速度方程準(zhǔn)確求得的前提下，縮短消除相的采血時間；增加吸收相的采血點，使得吸收相的時間點更加密集，并在峰濃度時設(shè)置采血點，讓整個實驗更加貼近藥物在體內(nèi)的實際過程。(2)加強(qiáng)學(xué)生的操作訓(xùn)練。包括耳緣靜脈取血的技術(shù)技巧性、移液器使用的規(guī)范性、HPLC操作的正確性等方面進(jìn)行指導(dǎo)、培訓(xùn)，以滿足該實驗的操作準(zhǔn)確性要求。(3)實現(xiàn)實驗屬性的轉(zhuǎn)型。如采用不同的給藥途徑(如肌注與口服)，對二者的藥動學(xué)參數(shù)、生物利用度對比；或者不同劑型間的藥動學(xué)參數(shù)、生物利用度進(jìn)行對比，將此驗證性實驗逐步向研究型實驗過渡[9]，并準(zhǔn)備在研究生課程中推進(jìn)中藥有效成分的藥動學(xué)參數(shù)估算的探究性實驗。

4結(jié)論

篇5

【關(guān)鍵詞】 周期性血管外給藥; 藥物動力學(xué)參數(shù); 圖像; 估算

利用數(shù)學(xué)模型確定藥物動力學(xué)參數(shù)，需要做繁雜的數(shù)值計算，這對于基層醫(yī)藥科研人員來說是一個不小的障礙。本文在分析模型參數(shù)幾何意義的基礎(chǔ)上，借助MATLAB的作圖功能，探求周期性血管外途徑給藥二室模型藥物動力學(xué)參數(shù)的估算。

1 周期性血管外給藥二室模型與藥物動力學(xué)參數(shù)的幾何關(guān)系

1.1 周期性血管外給藥二室模型及其參數(shù)

周期性血管外n 次給藥后，體內(nèi)血藥濃度C(n)1與時間t的二室模型為：C(n)1(t)=A11-e-n·α·τ1-e-α·τe-α·τ+A21-e-n·β·τ1-e-β·τe-β·τ-(A1+A2)

1-e-n·Kα·τ1-e-Kα·τe-Kα·τ(1)模型(1)中的t 是從第n 次給藥后開始計算的時間(0≤t≤τ)，其它各系數(shù)的含義見文獻(xiàn)[1]。若讓模型(1)中的n 趨向無窮，得到周期性血管外給藥二室模型的坪濃度：Css(t)=A111-e-α·τe-α·τ+A211-e-β·τe-β·τ-(A1+A2)11-e-Kα·τe-Kα·τ(2)由模型(1)、(2)在一個周期τ內(nèi)的平均值的比值得到達(dá)坪分?jǐn)?shù)：fss(n)=1τ〖JF(D〗τ0C(n)1(t)dt〖JF)〗1τ〖JF(D〗τ0Css(t)dt〖JF)〗=A1α(1-e-n·α·τ)+A2β(1-e-n·β·τ)-+A2Ka(1-e-n·Ka·τ)A1α+A2β-A1+A2Ka(3)最低坪濃度Cmin 與第一次給藥末端濃度C1(τ) 的比是積累系數(shù)：R=A11-e-α·τ+A21-e-β·τ-A1+A21-e-Kα·τ

A1e-α·γ+A2e-β·τ-(A1+A2)e-Kα·τ(4)通常在已知周期性血管外給藥二室模型的情況下，根據(jù)上述各式和牛頓迭代法可以計算出坪濃度、維持劑量、達(dá)坪狀態(tài)時周期性給藥的次數(shù)等藥物動力學(xué)參數(shù)。

1.1 模型的曲線與藥物動力學(xué)參數(shù)間的幾何關(guān)聯(lián)

由于模型的函數(shù)為初等函數(shù)，故模型對應(yīng)的曲線是連續(xù)、漸進(jìn)變化的，不會出現(xiàn)間斷或劇烈波動的情況，從而為從圖形中估算參數(shù)的數(shù)值提供了條件。下面的幾個參數(shù)與模型的曲線有如下關(guān)聯(lián)：① 坪濃度Css 是(1)的曲線穩(wěn)定變化時一個周期內(nèi)血藥濃度與時間的對應(yīng)關(guān)系。當(dāng)給藥次數(shù)n較大時，(1)的曲線在一個周期內(nèi)所對應(yīng)部分近似為坪濃度(2)的曲線。② 最低坪水平Cmin 是(1)的曲線在達(dá)坪狀態(tài)一個周期內(nèi)的最低點的縱坐標(biāo)，即達(dá)坪狀態(tài)下一個周期內(nèi)的最小值。③ 最高坪水平Cmax 是(1)的曲線在達(dá)坪狀態(tài)一個周期內(nèi)的最高點的縱坐標(biāo)，即達(dá)坪狀態(tài)下一個周期內(nèi)的最大值。④ 峰時Tm0 是(1)的曲線在達(dá)坪狀態(tài)下一個周期內(nèi)最高點與最低點的橫坐標(biāo)的差(0 ⑤ 當(dāng)周期性給藥劑量D0 一定時，改變給藥周期τ，通過(1)的曲線得到周期變化后的最高或最低坪濃度。反之，若給定安全濃度、有效坪濃度，由(2)的曲線可以估算出符合條件的給藥周期 。⑥ 由(3)的曲線上點的縱橫坐標(biāo)可以獲得達(dá)坪分?jǐn)?shù)fss(n) 與周期性血管外給藥次數(shù)n的對應(yīng)關(guān)系，從而估算出期望血藥濃度與周期性給藥次數(shù)的數(shù)量對應(yīng)。⑦ 積累系數(shù)R可由(1)的曲線在第一個周期末端的縱坐標(biāo)與(1)的曲線在達(dá)坪狀態(tài)一個周期內(nèi)的最低點的縱坐標(biāo)(即最低坪水平Cmin )的比值計算出來。

2 周期性血管外給藥藥物動力學(xué)參數(shù)的圖形估算實例

口服四環(huán)素溶液500mg者進(jìn)行血藥濃度測定，10人平均血藥濃度如下[1]：取樣時間t(hour)1234681224濃度C(mg/ml).05504.78464.90764.46293.72492.50351.0096若給藥周期為每日4次，由殘數(shù)法得到 n次給藥后藥時模型為：C(n)1(t)=1.93051·1-e-0.21849·n·τ1-e-0.21849·τe-0.21849·τ+6.20837·1-e-0.07568·n·τ1-e-0.07568·τe-0.07568·τ-8.13888·1-e-0.668·n·τ1-e-0.668·τe-0.668·τ(4)在MATLAB下畫出(4)和對應(yīng)達(dá)坪分?jǐn)?shù)fss(n) 的圖像，如圖1所示。圖1 藥時曲線，達(dá)坪分?jǐn)?shù)周期性給藥次數(shù)曲線由圖1可見：① 第8次周期性給藥后血藥濃度近似處于達(dá)坪狀態(tài)，之后每個給藥周期內(nèi)的圖像即為坪濃度Css與給藥時間的對應(yīng)關(guān)系。② 最高坪水平Cmax=YA=1414(mg/ml) ，最低坪水平Cmin=YB=1135(mg/ml) ，峰時T0=xA-xB=1.97(h) 。③ 當(dāng)給藥次數(shù)為4或10時，達(dá)坪分?jǐn)?shù)分別為給藥fss(4)=YD=82.99% ，fss(10)=YE=98.89% 。④ 累積系數(shù)R=CminYC=11.354.315≈2.63036 。⑤ 當(dāng)每日給藥次數(shù)改變?yōu)?次或2次，即給藥周期為8h或12h時，從圖2中的F，G，H，L點的縱坐標(biāo)能夠得周期變化后的最高或最低坪濃度。圖3是在峰時T0=1.97(h) ，周期性給藥劑量D0不變的狀況下，安全濃度Cmax 和有效濃度Cmin 與變量τ的曲線，其函數(shù)表達(dá)式為：Cmax=1.93051·1-e-0.21849·T01-e-0.21849·τ+6.20837·1-e-0.07568·T01-e-0.07568·τ

-8.13888·1-e-0.668·T01-e-0.668·τ(5)Cmin=1.93051·11-e-0.21849·τ+6.20837·11-e-0.07568·τ-8.13888·11-e-0.668·τ(6)從圖3可以看出，若要求安全濃度Cmax=13.11(mg/ml) ，則給藥周期τ≥xM=6.559(h) ;若要求有效濃度Cmin=6(mg/ml) ，則給藥周期τ≥xN=9.678(h) 。圖2 8小時和12小時周期性給藥的‘藥時曲線’圖3 安全濃度Cmax和有效濃度Cmin與變動周期τ的曲線

3 結(jié)語

本研究探討了借助圖像估算周期性血管外給藥狀態(tài)下的藥物動力學(xué)參數(shù)，該方法有以下特點：① 由于MATLAB作圖快捷、方便，使得藥物動力學(xué)參數(shù)的估算簡潔，高效，回避了繁難的數(shù)學(xué)計算。便于基層臨床科研人員和醫(yī)藥院校師生借鑒與使用。② 鑒于MATLAB圖形界面中，按鈕Data Cursor僅能顯示到點的坐標(biāo)的百分位，故此，估算參數(shù)會有不超過百分之一的誤差。不過通過圖形界面的圖形放大功能，能得到萬分之一精度的估算值。③ 本問題的處理方式可拓廣到其它給藥方式藥物動力學(xué)參數(shù)的估算上。

【參考文獻(xiàn)】

1 劉昌孝，劉定運(yùn).藥物動力學(xué)概論.北京：中國學(xué)術(shù)出版社，1984，157～169.

篇6

【關(guān)鍵詞】 梔子柏皮湯；配伍；藥代動力學(xué)

梔子柏皮湯源于《傷寒論》， 由梔子、黃柏和炙甘草三種中藥組成， 在身黃發(fā)熱癥、傷寒治療方面具有良好功效[1]。藥代動力學(xué)可用于研究不同配伍對藥物在體內(nèi)的吸收、分布、代謝和排泄的影響， 從而明確發(fā)揮藥效的物質(zhì)基礎(chǔ)[2]。本文就梔子柏皮湯不同配伍對梔子苷體內(nèi)藥代動力學(xué)的影響進(jìn)行研究?，F(xiàn)報告如下。

1 材料與方法

1. 1 藥品與試劑 梔子苷對照品購自中國藥品生物制品檢定所， 批號：110749-200714；中藥梔子、黃柏和炙甘草購自桂平市人民醫(yī)院藥劑科；色譜純乙腈和甲醇購自美國Tedia公司；分析純冰乙酸購自國藥化學(xué)試劑有限公司。

1. 2 儀器 高效液相色譜儀Agilent 1200型（美國Ailent公司）；高速冷凍離心機(jī)Z32HK型（上海賀默儀器科技有限公司）；真空干燥箱DZF-6020MBE型（上海博訊實業(yè)有限公司）。

1. 3 動物 SD大鼠， 雌雄各15只， 230～250 g， 南方醫(yī)科大學(xué)動物實驗中心提供， 合格證號：0092481。

1. 4 方法

1. 4. 1 標(biāo)準(zhǔn)溶液配制 精確稱量1 mg梔子苷對照品， 甲醇溶解配制成0.1 g/L儲液， 倍比稀釋成0.5、1、2、4、8、16、20 mg/L的系列工作液。

1. 4. 2 湯劑制備及含量測定 按10∶6∶3比例稱取梔子、黃柏及炙甘草， 100℃蒸餾水煎煮3次， 20 min/次， 煎液合并過濾取上清， 濃縮后取100 μl上清液甲醇稀釋至1000倍， 混勻后離心取上清液， 0.22 μm濾膜過濾后HPLC分析測定梔子苷含量。梔子、梔子-黃柏及梔子-炙甘草的湯劑制備及梔子苷含量測定方法同上。

1. 4. 3 色譜條件 Agilent TC-C18色譜柱（4.6 mm×250 mm， 5 μm）；柱溫25℃；進(jìn)樣量為10 μl；流動相為0.1%冰乙酸水溶液-甲醇；檢測波長為238 nm。

1. 4. 4 藥代動力學(xué)實驗 將30只SD大鼠隨機(jī)分為5組， 每組6只。雌雄各3只， 實驗前12 h禁食， 以40 mg/kg梔子苷的標(biāo)準(zhǔn)給予梔子苷單體、梔子、梔子-炙甘草、梔子-黃柏和梔子-黃柏-炙甘草灌胃， 于給藥后6、15、30、45 min及1、2、4、6、8、10 h進(jìn)行眼眶取血， 肝素離心管離心取上清后凍存待測。

1. 4. 5 血漿樣品預(yù)處理 取200 μl血漿， 加600 μl乙腈混勻后離心取700 μl上清， 真空干燥后用100 μl的30%甲醇溶液進(jìn)行復(fù)溶， 然后測定。

1. 5 統(tǒng)計學(xué)方法 采用3P97藥代動力學(xué)軟件進(jìn)行血藥濃度-時間數(shù)據(jù)分析， 采用SPSS17.0統(tǒng)計學(xué)軟件進(jìn)行統(tǒng)計分析， 計量資料以均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差（ x-±s）表示， 采用t檢驗；計數(shù)資料以率（%）表示， 采用χ2檢驗。P

2 結(jié)果

2. 1 線性范圍 取200 μl SD大鼠空白血漿， 加入梔子苷系列工作液， 分別配制成0.05、0.10、0.20、0.40、0.80、1.20、1.60及2.00 mg/L樣品進(jìn)行測定， 以梔子苷峰面積為縱坐標(biāo)， 以梔子苷濃度為橫坐標(biāo)， 得到線性方程為Y=0.6926X+0.0248 （r=0.9997）， 線性范圍為0.06～2.00 mg/L。

2. 2 藥代動力學(xué)研究 5組SD大鼠分別灌胃含等量梔子苷的梔子苷單體溶液及梔子、梔子-炙甘草、梔子-黃柏、梔子-黃柏-炙甘草湯劑， 經(jīng)血藥濃度-時間數(shù)據(jù)分析結(jié)果表明， 湯劑組AUT及T1/2顯著高于梔子苷單體組， 梔子-炙甘草、梔子-黃柏及梔子黃柏-炙甘草組T1/2、AUT0-t及AUT0-∞均顯著高于梔子組， 梔子-黃柏-炙甘草組AUT0-t、AUT0-∞、T1/2、Tmax及Cmax均高于其他組， 組間比較差異有統(tǒng)計學(xué)意義（P

3 討論

中藥配伍是中醫(yī)藥基本理論之一， 是中醫(yī)藥現(xiàn)代化研究的重要組成部分之一[3]。目前， 中藥方劑配伍的研究已經(jīng)從組織器官、動物模型發(fā)展到了藥細(xì)胞， 甚至分子水平[4]。中藥藥代動力學(xué)在考察中藥體內(nèi)分布、吸收、代謝和排泄方面具有重要作用[5]。本研究初步建立了利用HPLC研究梔子柏皮湯不同配伍對梔子苷體內(nèi)藥代動力學(xué)影響的測定方法， 并利用此方法研究發(fā)現(xiàn)， 湯劑給藥比梔子苷單體給藥生物利用度高， 全組方給藥比其他配伍給藥生物利用度高， 從而說明， 梔子柏皮湯藥材間相互作用有助于促進(jìn)梔子苷吸收， 從而提高藥物生物利用度。

參考文獻(xiàn)

[1] 張英豐， 董宇， 朱曉新. 中藥復(fù)方藥代動力學(xué)研究的方法與思考. 中國天然藥物， 2008， 6（5）：321-324.

[2] 韓靜文， 黃成， 宋玨， 等. 梔子柏皮湯不同配伍在大鼠體內(nèi)的藥代動力學(xué)研究. 中國實驗方劑學(xué)雜志， 2014， 20（8）：110-113.

[3] 黃立華， 夏侯林， 王建安. 息香在大鼠體內(nèi)的藥代動力學(xué)研究. 時珍國醫(yī)國藥， 2013， 24（4）：813-814.

[4] 張鵬， 楊秀偉. 紫花前胡苷在大鼠體內(nèi)的藥代動力學(xué)研究. 中國藥理學(xué)通報， 2008， 24（9）：1240-1244.

篇7

目的：了解藥品說明書中兒童用藥內(nèi)容的標(biāo)注情況。方法：對我院門診西藥房常用的346種藥品的說明書中有關(guān)兒童用藥的標(biāo)示情況進(jìn)行調(diào)查分析。結(jié)果：準(zhǔn)確標(biāo)注兒童用藥占67.9%，標(biāo)注兒童用藥“尚未明確”占15.3%，標(biāo)注遵醫(yī)囑或用量酌減占14.5%，標(biāo)注“兒童慎用”占2.3%。在準(zhǔn)確給出兒童劑量的說明書中，劑量以年齡計算占23.1%，以體重計算占32.9%，以年齡和體重計算占21.6%，直接給出劑量占22.4%。結(jié)論：藥品說明書中還存在兒童用藥內(nèi)容缺失的問題，需引起各方面重視，加強(qiáng)管理，不斷完善。

【關(guān)鍵詞】 藥品說明書 兒童 規(guī)范

［Abstract］ Objective:To learn the contents about child medication in drug instructions. Methods: Three hundred and fortysix drug instructions sampled from the pharmacy in our hospital were investigated and analyzed on the part for child medication. Results: The rate of the dosage for child medication accurately marked was 67.9%， and that of child dosage with the mark of “not yet clear” was 15.3%， and with the mark of “amount prescribed or reduced” was 14.5%， and the mark of “children caution” was 2.3%. Among the instructions with accurate dosage for children， 23.1% was calculated by age， 32.9% by body weight， 21.6% by both age and weight， and the other 22.4% was given directly. Conclusions: The contents of child medication are far from perfect， which should draw attention to better management.

［Key words］ Package inserts of drug; Children; Standard

藥品作為一種特殊商品，直接關(guān)系到民眾的身體健康和生命安全。藥品說明書中應(yīng)當(dāng)包含藥品安全性、有效性的重要科學(xué)數(shù)據(jù)、結(jié)論和信息，用以指導(dǎo)安全合理使用藥品。藥品說明書是醫(yī)務(wù)人員和患者了解藥品的重要途徑。據(jù)一項調(diào)查顯示，90%以上的患者在第一次使用某種藥品前都要閱讀說明書，尤其是給兒童用藥更是如此［1］。兒童是一個具有特殊生理特點的群體，其機(jī)體各系統(tǒng)、各器官的功能完善是一個逐漸成熟的過程，對藥品的耐受性和敏感性也各不相同，不同的生理特點決定了其用藥的特殊性。本文試圖通過調(diào)查分析兒科門診常用西藥的藥品說明書，參考《藥品說明書和標(biāo)簽管理規(guī)定》、《化學(xué)藥品非處方藥說明書規(guī)范細(xì)則》和《化學(xué)藥品和生物制品說明書規(guī)范細(xì)則》（下簡稱《規(guī)定》和《細(xì)則》），對其中不足之處提出改進(jìn)建議，為進(jìn)一步規(guī)范藥品說明書提供參考。

1 資料與方法

收集我院門診西藥房常用藥品的藥品說明書346份（以商品名計），其中處方藥289份，非處方藥57份。參考《規(guī)定》和《細(xì)則》，對說明書的內(nèi)容進(jìn)行統(tǒng)計分析，重點對影響兒童用藥安全與效果的“用法用量”、“兒童用藥”、“藥代動力學(xué)”、“藥物過量”等項目進(jìn)行探討分析。

2 結(jié)果

2.1 說明書項目標(biāo)注情況

在346份藥品說明書中，藥品名稱、成份、性狀、適應(yīng)癥、規(guī)格、用法用量、不良反應(yīng)、注意事項、禁忌、貯藏、包裝、有效期、執(zhí)行標(biāo)準(zhǔn)、批準(zhǔn)文號、生產(chǎn)企業(yè)等項目形式與內(nèi)容標(biāo)注都完整，故本調(diào)查僅針對表1中存在缺漏的項目進(jìn)行比較。

2.2 兒童用法用量具體標(biāo)示情況

在346份藥品說明書中，兒童用藥的用法用量主要集中標(biāo)注在“用法用量”和“兒童用藥”兩個項目中，個別標(biāo)注在“注意事項”、“禁忌“等項目中，各項標(biāo)注綜合后的情況見表2。

表1 346份藥品說明書有關(guān)項目標(biāo)注情況（略）

表2 346份藥品說明書兒童用藥標(biāo)注情況（略）

2.3 兒童用藥劑量換算情況

在準(zhǔn)確給出兒童劑量的235份藥品說明書中，劑量的確定方式分別按年齡、體重、年齡和體重以及直接給出劑量如“成人一包，兒童半包”等4類，統(tǒng)計結(jié)果見表3。

表3 兒童用藥劑量換算情況（略）

3 討論

3.1 項目標(biāo)示完整率

從表1可以看出，項目標(biāo)示形式完整率較高，絕大多數(shù)藥品生產(chǎn)企業(yè)對《規(guī)定》和《細(xì)則》形式上落實較好。同時藥物過量、藥代動力學(xué)、藥物相互作用項目內(nèi)容標(biāo)示率不高，臨床試驗是非強(qiáng)迫性內(nèi)容，僅有6份（2.1%）說明書有詳細(xì)的臨床試驗結(jié)果。

3.2 兒童用法用量

用法用量是藥品說明書的核心部分，直接關(guān)系到臨床用藥的安全與效果。調(diào)查中發(fā)現(xiàn)僅有67.9%的藥品標(biāo)注了兒童用法用量，其中還有部分雖有標(biāo)示卻不明確，如“兒童用量酌減”、“遵醫(yī)囑”或“慎用”等含糊語句，使醫(yī)務(wù)人員及患者無法準(zhǔn)確判斷。同時在兒童用藥劑量的確定方法上存在較大不同，4種劑量確定方式都各占相當(dāng)比例。以按體重計算為例，以7歲兒童平均體重為25.69 kg計算［2］，有部分藥品按說書明劑量已超過成人用量，肥胖兒童可能在更小年齡就達(dá)到成人劑量。美國醫(yī)藥協(xié)會藥劑委員會推薦按體表面積計算兒童用藥量［3］。不同的兒童劑量計算方法各有優(yōu)缺點，藥品監(jiān)督管理部門有必要根據(jù)實際情況，確定不同藥品說明書中更為準(zhǔn)確合理的兒童劑量方法，以指導(dǎo)兒童的安全、合理用藥。

3.3 兒童藥代動力學(xué)

藥代動力學(xué)是研究藥物在人體內(nèi)量的變化規(guī)律，其對兒童合理用藥特別是個體化給藥有直接的指導(dǎo)意義。從表1調(diào)查發(fā)現(xiàn)，明確標(biāo)注兒童藥代動力學(xué)的僅占17.3%，對醫(yī)師的指導(dǎo)作用不夠。因兒童對藥物的吸收、轉(zhuǎn)運(yùn)和代謝與成人有較大差異，若稍有不慎，極易導(dǎo)致兒童用藥出現(xiàn)藥物過量或藥效下降，帶來用藥隱患。說明書中兒童藥物動力學(xué)的缺項，并不是藥品說明書本身的問題，主要原因在于我國兒童藥物動力學(xué)研究比較薄弱，新藥上市缺乏兒童藥動學(xué)資料，因此，兒童藥動學(xué)研究亟待加強(qiáng)。

3.4 兒童藥物過量

兒童用藥中該項內(nèi)容的標(biāo)注率最低，尤其是許多說明書中對于藥物過量的處理僅用“對癥治療”等較含糊的語句，指導(dǎo)性很不明確。建議增加發(fā)生藥物過量后的具體解救措施。

4 思考與建議

4.1 加強(qiáng)藥品說明書的監(jiān)督管理

藥品監(jiān)督管理部門負(fù)責(zé)審查藥物的安全性、有效性和說明書是否符合要求。對于藥品說明書中存在的問題，建議藥品監(jiān)督管理部門針對兒童用藥的具體特點，加強(qiáng)藥品說明書的規(guī)范和管理。首先要提高說明書內(nèi)容的準(zhǔn)確性。部分藥品說明書存在項目遺漏，個別說明書在敘述中避重就輕、含糊其辭，未能反映藥品的真實情況，從而使患者的知情權(quán)受到侵犯，且易引起醫(yī)療糾紛。因此，應(yīng)進(jìn)一步加強(qiáng)藥品說明書內(nèi)容的審核，必要時定期對藥品說明書的內(nèi)容進(jìn)行修訂，保證項目的完整和內(nèi)容的準(zhǔn)確性。建議新藥的藥品說明書定期進(jìn)行審核和修改，以保證其科學(xué)性、合理性和有效性，盡早解決說明書中的某些不合理或不具操作性的問題，從而將藥品說明書中的問題減少至最低。

4.2 強(qiáng)化藥品生產(chǎn)企業(yè)的責(zé)任

《規(guī)定》和《細(xì)則》中明確要求藥品生產(chǎn)企業(yè)應(yīng)對說明書內(nèi)容的真實性、準(zhǔn)確性和完整性負(fù)責(zé)，并密切關(guān)注藥品使用的安全性問題，及時完善安全性信息。藥品生產(chǎn)企業(yè)是藥品質(zhì)量的直接負(fù)責(zé)人，藥品說明書可以直接影響藥品的使用，這就要求企業(yè)重視藥品說明書的內(nèi)容規(guī)范，提高法制觀念。在制定藥品說明書時，應(yīng)完整標(biāo)注項目，增加對特殊人群用藥安全的關(guān)注，明確用法用量，開展相關(guān)研究，及時更新說明書。

4.3 鼓勵開發(fā)兒童適用規(guī)格劑型的藥品

由于兒童適用規(guī)格、劑型的藥品較少，兒童用藥面臨比成人用藥更多的問題。雖然近幾年兒童專用藥有了一定的發(fā)展，但在臨床使用中仍以成人藥為主，這不僅增加了兒童藥品不良反應(yīng)發(fā)生率，也對患兒及醫(yī)護(hù)人員在用藥時帶來不便。監(jiān)督管理部門應(yīng)著力在政策上激勵企業(yè)研發(fā)兒童專用藥品，鼓勵醫(yī)院及科研單位收集兒童用藥的應(yīng)用信息，加強(qiáng)和推進(jìn)兒童臨床試驗研究，促進(jìn)兒童用藥的安全化及合理化。

【參考文獻(xiàn)】

［1］ 成名戰(zhàn). 談藥品包裝及說明書不規(guī)范現(xiàn)象［J］. 時珍國醫(yī)國藥， 2001， 12(3): 237.

篇8

[關(guān)鍵詞] 燈盞細(xì)辛注射液；綠原酸；咖啡酸；大鼠；藥代動力學(xué)；LC-MS/MS

[稿件編號] 2013-03-13

[基金項目] 國家“重大新藥創(chuàng)制”科技重大專項（2012ZX09303009-002）；江蘇省中醫(yī)藥領(lǐng)軍人才項目（LJ200906）；江蘇高校優(yōu)勢學(xué)科建設(shè)工程項目（2010）

[通信作者] *居文政，Tel：（025）86617141-60310，E-mail：wzhju333@163、com 燈盞細(xì)辛注射液為燈盞細(xì)辛的干燥全草經(jīng)提取制成的中藥注射液，收載于2010年版《中國藥典》一部[1]，具有活血化瘀，通絡(luò)止痛的功效，是目前臨床上使用較為廣泛的治療心腦血管疾病的傳統(tǒng)中藥之一。以往研究表明燈盞細(xì)辛的有效成分主要為黃酮類成分――燈盞乙素。通過深入研究，發(fā)現(xiàn)酚酸類成分也具有擴(kuò)張血管和抑制血栓形成的藥理活性[2]。中藥酚酸類成分包括咖啡酸、綠原酸等，因其顯著的抗炎、抗氧化、抗凝血等多種生物活性而被國內(nèi)外廣泛研究[3-5]。

在燈盞細(xì)辛注射液中，已證實黃酮類與酚酸類協(xié)同發(fā)揮藥效作用[6-7]，而燈盞乙素在體內(nèi)代謝過程已有較多文獻(xiàn)報道[8-10]，對酚酸類成分的體內(nèi)代謝過程研究卻比較少。因此深入研究酚酸類成分對明確燈盞細(xì)辛注射液的藥動藥效至關(guān)重要。本文旨在建立高效、靈敏的LC-MS/MS用于測定大鼠尾靜脈注射燈盞細(xì)辛注射液后綠原酸和咖啡酸的血藥濃度，并用于燈盞細(xì)辛注射液在大鼠體內(nèi)的藥代動力學(xué)研究。

1 材料

1、1 試藥 燈盞細(xì)辛注射液（云南生物谷燈盞花藥業(yè)有限公司，批號20120551，規(guī)格10 mL/支）；對照品咖啡酸（批號110885-200102）、綠原酸（批號110753-200413）和替硝唑（批號100336-200402）均購于中國食品藥品檢定研究院。水為超純水，甲酸、甲醇、乙腈為色譜純，其他試劑均為分析純。

1、2 儀器 Agilent 1200高效液相色譜儀；API 4000 LC-MS/MS三重四級桿質(zhì)譜儀，配有電噴霧化離子源（ESI），色譜工作站：Analyst 1、4、2；AE240電子天平（上海梅特勒-托利多有限公司）；MICRO-17R冷凍離心機(jī)（美國Thermo公司）；WH-2微型旋渦混合儀（上海滬西分析儀器廠）；Drict-Q5超純水機(jī)（法國Millipore公司）。

1、3 動物 SD大鼠，雌雄各半，6只，體重250～270 g，由南京中醫(yī)藥大學(xué)實驗動物中心提供，合格證號SCXK（浙）2008-0033。

2 方法

2、1 色譜及質(zhì)譜檢測條件 Agilent ZOBAX SB C18色譜柱（4、6 mm×150 mm， 5 μm）；流動相為甲醇-2 mmol?L-1醋酸銨水溶液（60∶40）；流速為500 μL?min-1；柱溫30 ℃。離子源ESI；離子化模式負(fù)離子；定量模式為多反應(yīng)檢測模式（MRM）；離子源電壓4 000 V；離子源溫度400 ℃；綠原酸的DP，EP，CE，CXP-56 ，-11，-30，-4 V；咖啡酸的DP，EP，CE及CXP分別為-50，-10，-25，-5 V；替硝唑的DP，EP，CE，CXP分別為-25，-10，-15，-8 V；檢測對象綠原酸m/z 353、1/191、0；咖啡酸m/z 178、9/134、9；替硝唑m/z 246、0/125、8。

2、2 對照品溶液的配制 精密稱取適量綠原酸對照品，用甲醇配制成3、84 mg?L-1的儲備液；精密吸取適量，用甲醇分別稀釋成3 840，1 920，960，480，240，120，30 μg?L-1的系列標(biāo)準(zhǔn)溶液。精密稱取適量咖啡酸對照品，用甲醇配制成1、28 mg?L-1的儲備液；精密吸取適量，用甲醇分別稀釋成1 280，640，320，160，80，40，20 μg?L-1的系列標(biāo)準(zhǔn)溶液。以上溶液于4 ℃保存，備用。

2、3 內(nèi)標(biāo)物溶液的配制 精密稱取適量替硝唑?qū)φ掌?，用甲醇溶解并稀釋?、2 mg?L-1，于4 ℃保存，備用。

2、4 血漿樣品處理 取血漿樣品100 μL，加入1、2 mg?L-1替硝唑溶液（內(nèi)標(biāo)）20 μL，1 mol?L-1鹽酸溶液50 μL，渦旋30 s，再加入乙酸乙酯800 μL，渦旋振搖3 min，12 000 r?min-1離心5 min。取上清液750 μL，40 ℃氮?dú)饬鞔蹈?，?00 μL 50%甲醇復(fù)溶，12 000 r?min-1離心5 min，取上清液5 μL進(jìn)樣分析。

2、5 給藥劑量的確定 燈盞細(xì)辛注射液靜脈注射臨床給藥劑量為20～40 mL?d-1，每日1～2次，人的平均體重按60 kg計算，則其臨床給藥劑量為0、33～1、33 mL?kg-1。按大鼠每千克體重的臨床等效量是人的6倍計算，則燈盞細(xì)辛注射液大鼠尾靜脈注射給藥劑量為1、98～7、98 mL?kg-1，經(jīng)預(yù)實驗，確定大鼠給藥劑量為4 mL?kg-1。經(jīng)測定，該注射液中綠原酸質(zhì)量濃度為170、3 mg?L-1，咖啡酸質(zhì)量濃度為135、1 mg?L-1

2、6 藥代動力學(xué)研究 SD大鼠6只，給藥前12 h禁食不禁水，分別尾靜脈注射燈盞細(xì)辛注射液4 mL?kg-1。于給藥前及給藥后5，10，20，30，45 min，1，1、5，2，3，4，6，8，10，12 h經(jīng)眼眶后靜脈叢取血約0、3 mL，置于肝素化試管中，以4 000 r?min-1離心10 min，取上層血漿于-40 ℃保存待測。

2、7 數(shù)據(jù)處理 大鼠靜脈給藥后測得的血藥濃度（C）-時間（t）數(shù)據(jù)應(yīng)用DAS 1、0軟件進(jìn)行處理。選擇適宜的數(shù)學(xué)模型擬合，計算藥代動力學(xué)參數(shù)。

3 結(jié)果

3、1 專屬性實驗 在本實驗所采用的LC-MS/MS條件下，咖啡酸、綠原酸和替硝唑的保留時間分別為2、6，2、5，3、4 min。咖啡酸、綠原酸和內(nèi)標(biāo)互不干擾，峰形良好，無雜峰干擾，基線平穩(wěn)，見圖1。

3、2 標(biāo)準(zhǔn)曲線制備 取空白血漿100 μL，分別加入綠原酸、咖啡酸對照品系列標(biāo)準(zhǔn)溶液各10 μL，配制成相當(dāng)于綠原酸及咖啡酸血漿質(zhì)量濃度分別為3，12，24，48，96，192，384 μg?L-1和2，4，8，16，32，64，128 μg?L-1的血漿樣品。按2、4項下操作，取5 μL進(jìn)樣分析。以各成分峰面積與內(nèi)標(biāo)峰面積的比值Y對血漿質(zhì)量濃度X進(jìn)行線性回歸運(yùn)算，求得的回歸方程即為標(biāo)準(zhǔn)曲線。綠原酸回歸方程：Y=0、435 7X-0、010 7（r = 0、998 7），定量下限為3 μg?L-1?？Х人峄貧w方程Y=1、109 8X-0、058 7（r = 0、998 1），定量下限為2 μg?L-1。

3、3 準(zhǔn)確度和精密度 取空白血漿100 μL，按上述2、4項下制備綠原酸和咖啡酸低、中、高3個質(zhì)量濃度（綠原酸血漿質(zhì)量濃度為3，48，192 μg?L-1；咖啡酸血漿質(zhì)量濃度為2，16，64 μg?L-1）的質(zhì)量控制（QC）樣品，每個濃度平行做5份，連續(xù)測定3 d。根據(jù)隨行標(biāo)準(zhǔn)曲線求得實測濃度。實測濃度的RSD即為精密度，實測濃度和加入濃度的比值即為準(zhǔn)確度。結(jié)果表明，綠原酸日內(nèi)、日間準(zhǔn)確度分別為97、7%～101、3%（RSD≤8、5%，n=5）和96、1%～103、8%（RSD≤9、4%，n=15）；咖啡酸日內(nèi)、日間準(zhǔn)確度分別為92、3%～106、7%（RSD≤8、8%，n=5）和98、2%～108、1%（RSD≤9、8%，n=15），實驗結(jié)果符合生物樣品分析方法的要求。

3、4 提取回收率 取空白血漿100 μL，配制3、3項下低、中、高3個不同濃度含藥血漿質(zhì)控樣品，按上述2、4項下操作后進(jìn)樣分析，以血漿中綠原酸、咖啡酸的峰面積與相應(yīng)質(zhì)量濃度對照品溶液中綠原酸、咖啡酸峰面積的比值計算出上述3種質(zhì)量濃度的提取回收率，每個濃度平行做5份。經(jīng)LC-MS/MS測定后，低、中、稿3種濃度下的提取回收率分別為綠原酸（84、3±5、5）%，（89、1±3、3）%，（92、4±6、3）%；咖啡酸（82、1±1、9）%，（85、2±6、0）%，（88、2±4、6）%。采用同樣的方法考察了內(nèi)標(biāo)的提取回收率為（90、1±2、4）%。

A、 空白血漿樣品；B、 混合對照品；C、 血漿樣品；1、 咖啡酸；2、綠原酸；3、替硝唑。

圖1 樣品的液-質(zhì)聯(lián)用離子流圖

Fig、1 Combined LC-MS/MS ion chromatograms of samples

3、5 穩(wěn)定性考察 取空白血漿100 μL，配制3、3項下低、中、高3個不同濃度含藥血漿質(zhì)控樣品，按上述2、4項下操作方法處理樣品?？疾旌幯獫{樣品處理好后溶液中分析物在室溫放置24 h、含藥血漿樣品-20 ℃反復(fù)凍融3次、含藥血漿樣品-40 ℃長期冷凍28 d的穩(wěn)定性，每個濃度平行3份。結(jié)果表明，經(jīng)處理后的血漿樣品室溫放置24 h后綠原酸及咖啡酸血藥濃度的RSD均小于9、82%，-40 ℃保存28 d血藥濃度的RSD 均小于8、65%，經(jīng)過3個凍融周期后2個分析物的血藥濃度RSD均小于9、57%。

3、6 介質(zhì)效應(yīng)考察 取離心管數(shù)只，分別精密加入低、中、高的3個濃度綠原酸對照品溶液（30，480，1 920 μg?L-1）及咖啡酸對照品溶液（20，160，640 μg?L-1）各10 μL，再分別加入內(nèi)標(biāo)替硝唑溶液20 μL，水60 μL，旋渦1 min，于12 000 r?min-1離心5 min，進(jìn)行LC-MS/MS分析，進(jìn)樣量5 μL，記錄峰面積A1。除不加內(nèi)標(biāo)外，另按“血漿樣品處理”項下操作提取空白血漿數(shù)管，揮干后同上操作，記錄峰面積A2。A1和A2的比值（A2/A1×100%）即為介質(zhì)效應(yīng)ME（%）。綠原酸及咖啡酸血漿樣品低、中、高3種濃度LC-MS/MS介質(zhì)效應(yīng)（n=3）分別為83、14%，86、32%，83、90%和86、79%，92、15%，88、24%，內(nèi)標(biāo)替硝唑介質(zhì)效應(yīng)（n=9）為82、53%。

3、7 大鼠體內(nèi)藥代動力學(xué) 大鼠單劑量（4 mL?kg-1）尾靜脈注射燈盞細(xì)辛注射液后綠原酸和咖啡酸的血藥濃度-時間曲線見圖 2。所測數(shù)據(jù)使用DAS 1、0軟件進(jìn)行處理，主要藥動學(xué)參數(shù)見表 1。由分析結(jié)果可知，綠原酸和咖啡酸在大鼠體內(nèi)的藥動學(xué)符合二室開放模型。

圖2 大鼠體內(nèi)綠原酸和咖啡酸的平均血藥濃度-時間曲線（n=6）

Fig、2 Mean plasma concentration-time curves for chlorogenic acid and caffeic acid in rat plasma（n=6）

4 討論

目前文獻(xiàn)報道的中藥復(fù)方制劑中綠原酸和咖啡酸的血藥濃度測定方法大多為HPLC[11-13]，且目前燈盞細(xì)辛注射液在大鼠體內(nèi)的藥代動力學(xué)研究主要測定燈盞乙素和總咖啡酸酯[14-15]，對于注射液中單

個酚酸化合物的藥代動力學(xué)研究較少。

本實驗采用LC-MS/MS測定血漿中綠原酸和咖啡酸的濃度，提高了靈敏度。另外，本文對血樣中酚酸類成分的提取方法進(jìn)行了考察：甲醇沉淀、乙腈沉淀、乙酸乙酯提取、乙酸乙酯/乙醚（3∶1）提取，每個提取或沉淀條件考察了不同的酸化條件（加10，20，30，50，100 μL不同量的1 mol?L-1鹽酸），結(jié)果發(fā)現(xiàn)50 μL 1mol?L-1鹽酸酸化后乙酸乙酯的提取回收率高，無內(nèi)源性物質(zhì)干擾，重現(xiàn)性好。

蘇美英等[16]靜脈給予大鼠咖啡酸單體50 mg?kg-1后，咖啡酸單體在大鼠體內(nèi)的半衰期（t1/2）為（0、45±0、05） h，體內(nèi)駐留時間（MRT）為（0、24±0、06） h。本實驗中大鼠給予燈盞細(xì)辛注射液的劑量為4 mL?kg-1，若以咖啡酸含量計，咖啡酸的靜脈給藥劑量為540、4 μg?kg-1，而此時咖啡酸在大鼠體內(nèi)的t1/2為（130、91±38、77） min，MRT為（198、74±18、45） min。本實驗中咖啡酸的給藥劑量遠(yuǎn)低于50 mg?kg-1，但是注射液中咖啡酸在大鼠體內(nèi)的t1/2和MRT卻明顯高于單獨(dú)給予咖啡酸單體。由此推測，燈盞細(xì)辛注射液中的某些成分與咖啡酸發(fā)生相互作用，延長了咖啡酸在大鼠體內(nèi)的時間，但發(fā)生該現(xiàn)象的原因還不清楚，有待進(jìn)一步研究。

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Study on determination of caffeic acid， chlorogenic acid in rat plasma and

their pharmacokinetics with LC-MS/MS

DAI Guo-liang1， MA Shi-tang1 ， LIU Shi-jia2 ， CHENG Xiao-gui1 ， ZANG Yu-xin1 ， JU Wen-zheng2* ， TAN Heng-shan3

（1、 College of Pharmacy of Nanjing University of Traditional Chinese Medicine， Nanjing 210029， China；

2、 Department of Clinical Pharmacology， Affiliated Hospital of Nanjing University of

Traditional Chinese Medicine， Nanjing 210029， China；

3、 Department of Clinical Pharmacology， General Hospital of Nanjing Military Area Command， Nanjing 210002， China）

[Abstract] To establish a LC-MS/MS method to determine caffeic acid， chlorogenic acid in rat plasma and study their pharmacokinetics in rats、 Six Sprague-Dawley rats were intravenously injected with 4 mL?kg-1 of Dengzhanxixin injection， respectively、 Their drug plasma concentration was determined by LC-MS/MS， with tinidazole as an internal standard、 The pharmacokinetic parameters were calculated by DAS 1、0、 The linear concentration ranges of caffeic acid， and chlorogenic acid were 2-128 μg?L-1 （r=0、998 1） and 3-384 μg?L-1 （r=0、998 7）， respectively、 The methodological test showed conformance to the requirements、 The intraday and inter-day variable coefficients were both less than 10、0%， indicating that both of legitimate precise and accuracy were in conformity with the requirements of biological sample analysis、For caffeic acid， the pharmacokinetic parameter t1/2β， AUC0-t， and CL were （130、91±38、77） min， （4、89±0、96） mg?min?L-1 and （0、12±0、02） L?min-1?kg-1， respectively、 For chlorogenic acid， the pharmacokinetic parameter t1/2β， AUC0-t and CL were （49、38±8、85） min， （9、54±0、95） mg?min?L-1 and （0、09±0、003） L?min-1?kg-1， respectively、 The LC-MS/MS analysis method established in this study was proved to be so accurate and sensitive that it can be applied to the pharmacokinetic study of caffeic acid and chlorogenic acid、

篇9

【摘要】 對近年來國內(nèi)外關(guān)于中藥生物堿類化合物藥動學(xué)研究的文獻(xiàn)進(jìn)行檢索、整理分析和歸納總結(jié)，介紹其在體內(nèi)的測定方法、及生物堿單體、有效部位及復(fù)方的藥動學(xué)研究情況，同時指出了今后生物堿類化合物藥動學(xué)研究中需要關(guān)注的問題。

【關(guān)鍵詞】 生物堿; 分析方法; 藥動學(xué)

Abstract：To retrieve， analyze and summarize the literatures on the pharmacokinetic study of alkaloid compounds at home and abroad in recent years and to introduce the analytical method in vivo， the processes of the pharmacokinetics of active alkaloids， extract and prescription. At the same time the problem which needs to pay attention to for the future pharmacokinetic studies or alkaloid compounds was pointed out.

Key words： Alkaloid; Analytical method; Pharmacokinetic

生物堿廣泛存在于植物界中，如麻黃、貝母、黃連、烏頭等都主要含有生物堿成分，在臨床上已有很多應(yīng)用。生物堿結(jié)構(gòu)多樣，實驗證明其具有廣泛的生理和藥理活性，包括抗菌消炎、止咳平喘，抗瘧、抗心律失常、抗癌等，因此對該類化合物的研究已成為國內(nèi)外醫(yī)藥界研究的熱門課題。近年來，隨著靈敏度高、特異性強(qiáng)檢測技術(shù)的發(fā)展，生物堿類化合物的藥動學(xué)過程得到進(jìn)一步的揭示，為生物堿類藥物的篩選和臨床應(yīng)用提供了數(shù)據(jù)。現(xiàn)將近年來生物堿類化合物藥動學(xué)研究進(jìn)展綜述如下。

1 生物樣品分析方法

在生物堿類化合物的藥動學(xué)研究中，要對生物樣品中生物堿及其代謝產(chǎn)物進(jìn)行定量分析。首先應(yīng)該重視生物分析方法的確證，符合生物分析方法確證的指導(dǎo)原則[1]。目前最普遍的方法是高效液相色譜法，由于生物樣品(包括血漿、尿、唾液等)含有大量的內(nèi)源性物質(zhì)，必須對樣品進(jìn)行適當(dāng)預(yù)處理。

1.1 生物樣品前處理方法生物樣品測定前須進(jìn)行樣品預(yù)處理， 預(yù)處理是進(jìn)行分析測定過程的重要環(huán)節(jié)。通過預(yù)處理可以達(dá)到以下目的：①多數(shù)生物樣品必須經(jīng)過均勻化處理后才能測定;②排除內(nèi)源性雜質(zhì)和代謝物的干擾;③濃縮被測組份以滿足儀器檢測靈敏度的要求;④對呈結(jié)合狀態(tài)的藥物進(jìn)行水解處理。

目前最常用的有液-液萃取和液-固萃取，后者又稱為固相萃取(solid phase extraction， SPE)。比較簡單的處理方法是將生物樣品堿化后用甲醇、乙醇、乙腈等常見的蛋白沉淀試劑沉淀蛋白，高速離心后取上清液，吹干復(fù)溶后進(jìn)樣。丁志平等[2]在測定鹽酸小檗堿大鼠體內(nèi)血藥濃度時，將1 ml乙腈加入到0.5 ml血清中，超聲振蕩1 min，4 000 r·min-1離心15 min，取0.8 ml上清液于50℃減壓揮干，殘渣用0.4 ml流動相溶解，高速離心(14 000 r·min-1)10 min，取上清液50 μl進(jìn)樣?；厥章史謩e為(101.86±2.89)%，(99.38±2.29)%和(98.92±2.34)%。沉淀蛋白直接進(jìn)樣雖方法簡單，但需要沉淀試劑對樣品和內(nèi)標(biāo)有較高的溶解度。張蕾等[3]測定大鼠灌胃給予三物黃芩湯后血漿中苦參堿、氧化苦參堿和氧化槐果堿含量時，比較了氯仿、二氯甲烷-異丙醇(95∶5)和二氯甲烷-正己烷-異丙醇(100∶50∶5)對苦參堿、氧化苦參堿和氧化槐果堿的回收率，其中氯仿對待測物和內(nèi)標(biāo)的提取回收率較其他兩種混合溶劑高而且穩(wěn)定。SPE是近十幾年迅速發(fā)展起來的一種生物樣品預(yù)處理技術(shù)，其具有快速分離，回收率、精密度均較好，無乳化現(xiàn)象等諸多優(yōu)點，近幾年來在國內(nèi)外得到廣泛應(yīng)用。Yu等[4]測定黃連中多種生物堿類成分在大鼠血漿濃度時，將SPE小柱，用甲醇2 ml活化，1 ml去離子水洗去甲醇。精密吸取血漿樣品0.1 ml，加至SPE小柱，先用1 ml去離子水沖洗，再分別用1 ml甲醇溶液洗脫2次，收集甲醇液，45℃氮?dú)獯蹈桑?00 μl流動相溶解殘渣，高速離心后取10 μl進(jìn)樣。

1.2 檢測方法目前藥動學(xué)給藥方式一般采用口服和靜脈給藥兩種。靜脈給藥可以避免在胃腸道內(nèi)的代謝和分解以及肝臟的首過效應(yīng)，口服給藥則不可避免受到以上因素的影響，而且在胃腸道內(nèi)的吸收還受到劑型和自身理化性質(zhì)的影響，進(jìn)入體內(nèi)血液循環(huán)的藥量更低，導(dǎo)致樣品的濃度低。如果要準(zhǔn)確測定體液中的藥物濃度，應(yīng)選擇較高靈敏度的檢測器，其中紫外檢測器為HPLC最常用的檢測器。徐曉月等[5]采用紫外檢測器同時檢測了大鼠血漿中士的寧、馬錢子堿、士的寧氮氧化物和馬錢子堿氮氧化物，檢測限分別為0.262，0.250，0.290和0.257 ng·ml-1。Zhao等[6]在測定大鼠血漿中毒扁豆堿及其代謝產(chǎn)物氧化毒扁豆堿含量時采用光電二極管陣列檢測器，檢測限分別為10 ng·ml-1和25 ng·ml-1。除紫外檢測器外，應(yīng)用比較多的還有電化學(xué)和熒光檢測器。梁新麗等[7]測定大鼠血漿中延胡索乙素含量時采用熒光檢測器，最低定量限為2.096 ng·ml-1。近年由于質(zhì)譜技術(shù)的發(fā)展，特別是串聯(lián)質(zhì)譜技術(shù)廣泛應(yīng)用，其高靈敏度，專屬性強(qiáng)和分析速度快等優(yōu)點在藥動學(xué)研究發(fā)揮的作用越來越大。Yu等[4]采用液相色譜-質(zhì)譜(LC-MS)測定了大鼠灌服黃連提取物后小檗堿、黃藤素、黃連堿、表小檗堿及藥根堿體內(nèi)血藥濃度，其最低定量濃度均達(dá)到0.31 ng·ml-1。Wu等[8]采用LC-MS-MS測定志愿者靜注后血漿中氧化苦參堿及其代謝物苦參堿的濃度，其中苦參堿定量限為0.2 ng·ml-1，氧化苦參堿定量限為0.5 ng·ml-1。

2 藥動學(xué)研究

2.1 生物堿單體藥動學(xué)研究生物活性成分是中藥發(fā)揮療效的物質(zhì)基礎(chǔ)，其藥動學(xué)研究方法與化學(xué)合成藥物相似。從中藥中發(fā)現(xiàn)具有藥理活性的單體，研究其藥動學(xué)規(guī)律，是新藥創(chuàng)制的重要途徑。

小檗堿為黃連、黃柏、三棵針或其他小檗植物中提取的生物堿，具有廣譜抗菌、降低血壓及擴(kuò)張冠狀動脈、抗膽堿酯酶作用。人口服0.4 g，30 min后，血中濃度為1 μg·ml-1左右，不易吸收。采用同位素標(biāo)記法[9]對小檗堿進(jìn)行藥動學(xué)研究，結(jié)果表明大鼠靜脈注射后，主要經(jīng)尿排泄，糞排泄很少;膽汁中有較多放射性排泄，存在著肝腸循環(huán);血藥濃度-時間曲線符合二室模型?？鄥A型生物堿均具有以苦參堿為代表的基本結(jié)構(gòu)，屬于喹諾里西啶類生物堿，具有抗腫瘤、抗肝炎、抗心律失常、抑制中樞神經(jīng)系統(tǒng)等廣泛的藥理作用和生物活性[10]。目前對苦參堿型生物堿中苦參堿、氧化苦參堿、槐定堿、槐果堿、槐胺堿、拉馬寧堿等單一生物堿的藥物動力學(xué)進(jìn)行了廣泛深入的研究。Wu等[8]研究氧化苦參堿在人體內(nèi)藥動學(xué)規(guī)律，結(jié)果顯示氧化苦參堿及其體內(nèi)代謝產(chǎn)物苦參堿分別符合二室及一室模型，靜注給藥后只有小部分氧化苦參堿轉(zhuǎn)化為苦參堿。吳永江等[11]建立了一種液-質(zhì)聯(lián)用測定家兔血漿中槐定堿、槐果堿和苦參堿濃度的方法，結(jié)果表明槐定堿和槐果堿符合二室模型，而苦參堿則符合三室模型。

關(guān)附甲素為毛莨科植物黃花烏頭的塊根-關(guān)白附子中提取分離得到的活性單體化合物。藥理研究表明，關(guān)附甲素能減慢心律，顯著降低CaC12誘發(fā)的大鼠室顫發(fā)生率和死亡率，有穩(wěn)定心肌細(xì)胞膜及阻斷鈉通道等電生理活性。犬靜脈注射鹽酸關(guān)附甲素的藥-時曲線符合開放三室模型[12]，與文獻(xiàn)報道的人體內(nèi)結(jié)果較為一致，但T1/2α和T1/2β值較人體內(nèi)為長，說明鹽酸關(guān)附甲素在兩者的代謝有種屬間差異。烏頭堿是存在于烏頭屬多種植物中的一種雙酯型劇毒生物堿，具有鎮(zhèn)痛、抗炎、抗癲癇、抗腫瘤、提高免疫功能等多種生理活性，但因其具有強(qiáng)烈的心臟毒性和神經(jīng)毒性，安全系數(shù)小，治療劑量與中毒劑量接近，限制了對該化合物作為藥用的進(jìn)一步研究。Tazawat T等[13]采用酶聯(lián)免疫法分析烏頭堿在大鼠體內(nèi)的血藥濃度，結(jié)果表明按0.02 mg·kg-1劑量給大鼠靜脈注射烏頭堿，血藥濃度-時間曲線符合二室模型。

2.2 生物堿提取物(有效部位)及其制劑藥動學(xué)生物堿提取物藥動學(xué)研究報道有烏蘇里藜蘆堿、馬錢子總堿、貝母總生物堿等，有關(guān)制劑的藥動學(xué)研究有片劑、膠囊、固體自微乳、速釋微球、滴丸、注射液、乳劑及脂質(zhì)體等方面。

烏蘇里藜蘆堿為烏蘇里藜蘆根提取得到的總生物堿，近年研究發(fā)現(xiàn)其具有很強(qiáng)的抗栓作用，在大鼠頸動脈點刺激模型中能明顯延長血管栓塞時間(OT)，顯示很好的量效關(guān)系和時效關(guān)系;但其有效劑量僅μg級水平，有效血藥濃度極低，通?；瘜W(xué)測定法難以檢測，故采用藥理效應(yīng)法以O(shè)T為指標(biāo)，經(jīng)效應(yīng)-劑量-時間三維轉(zhuǎn)換，得量-時曲線為二室模型[14]。馬錢子為劇毒中藥，有效劑量和中毒劑量比較接近，臨床常用其治療一些慢性頑癥且較長期地給患者服用。徐曉月等[5]用HPLC法研究馬錢子砂燙炮制品中生物堿在大鼠體內(nèi)的藥動學(xué)，結(jié)果顯示大鼠靜脈注射馬錢子總堿后，其主要成分士的寧、馬錢子堿、士的寧氮氧化物和馬錢子堿氮氧化物的代謝均符合二室開放模型。貝母生物堿是貝母中止咳平喘主要活性成分，現(xiàn)已被開發(fā)成多種制劑，曾令杰等[15]對大鼠靜注伊犁貝母總生物堿后體內(nèi)各生物堿代謝動力學(xué)進(jìn)行了探討，研究結(jié)果顯示西貝素苷消除快，符合一室模型，而其苷元西貝素的消除慢，符合兩室模型，伊貝堿苷A的消除同樣比西貝素快，符合一室模型。

朱錦秀等[16]比較磷酸川芎嗪滴丸劑與片劑在健康人體內(nèi)的生物等效性，采用HPLC法測定血清中的藥物濃度，并用DAS2.0藥動學(xué)程序計算其藥動學(xué)參數(shù)和相對生物利用度，兩者的體內(nèi)過程均符合一室房室模型，受試制劑的相對生物利用度為(115.1±35.4)%，磷酸川芎嗪滴丸劑和片劑具有生物等效性。此外，羥基喜樹堿固體自微乳和速釋微球的結(jié)腸定位膠囊，漢防己甲素微球、苦參總堿注射液、氧化苦參堿生物黏附緩釋片及三尖杉酯堿高、低包裹率脂質(zhì)體在動物體內(nèi)的藥動學(xué)行為及體內(nèi)分布亦有相繼報道。

2.3 中藥復(fù)方中生物堿藥動學(xué)研究 由于中藥方劑中有效物質(zhì)基礎(chǔ)及作用方式極其復(fù)雜，因此中藥復(fù)方藥動學(xué)研究是中藥藥動學(xué)研究的難點。近年來，中藥復(fù)方生物堿藥動學(xué)研究逐漸增多。 麻黃湯中君藥麻黃所含生物堿類成分基本可看成是麻黃藥理作用的代表性成分，賀豐等[17]借助于GC-MS手段，用血藥濃度法進(jìn)行了中藥復(fù)方麻黃湯中麻黃堿和偽麻黃堿的人體動力學(xué)研究，結(jié)果顯示所有藥時曲線均符合一房室模型，從藥動學(xué)角度研究中藥復(fù)方配伍組方原則提供參考依據(jù)。補(bǔ)陽還五湯由黃芪、當(dāng)歸、赤芍、桃仁、川芎、紅花、地龍7味中藥組成，具有補(bǔ)氣、活血通絡(luò)之功效，方中主要代表成分為黃芪甲苷、川芎嗪、紅花苷、蛋白質(zhì)和多糖等。賀福元等(《中藥復(fù)方藥物動力學(xué)數(shù)學(xué)模型的建立及對補(bǔ)陽還五湯的研究》.成都中醫(yī)藥大學(xué)博士學(xué)位論文，2006)對大鼠靜注補(bǔ)陽還五湯總方及總生物堿后藥動學(xué)規(guī)律進(jìn)行了探討，結(jié)果顯示兩組方中川芎嗪藥動學(xué)均為二室模型且藥動學(xué)參數(shù)相近，但與單味川芎、純品川芎嗪的藥動學(xué)參數(shù)相差很大，提示中藥復(fù)方配伍能改變有效成分或部位制劑的藥動學(xué)參數(shù)。四逆湯由附子、干姜、炙甘草組成，是中醫(yī)回陽救逆的經(jīng)典名方，具有強(qiáng)心、抗休克作用。李銳等[18]應(yīng)用中醫(yī)方藥血藥PK-PD模型，以烏頭生物堿為指標(biāo)成分，探討四逆湯精制物藥動學(xué)與藥效動力學(xué)的相關(guān)性，揭示四逆湯的配伍規(guī)律。結(jié)果烏頭堿在犬體內(nèi)呈一級速度消除，具有開放一房室模型的特征，藥動學(xué)參數(shù)K血與K效、T1/2血與T1/2效接近，具有藥效產(chǎn)生快、作用維持時間較長的特點，反映出四逆湯“走而不守，守而不走”的特性。Zhang等[19]對18名健康志愿者靜脈注射參附粉針劑后體內(nèi)6種成分進(jìn)行測定，結(jié)果表明烏頭堿，新烏頭堿，次烏頭堿體內(nèi)濃度過低，無法檢測，而苯甲酰烏頭原堿，苯甲酰新烏頭堿，苯甲酰海帕烏頭原堿體內(nèi)血藥濃度-時間曲線符合一室模型。

此外，黃連解毒湯、黃連與生地黃不同比例配伍中鹽酸小檗堿在大鼠體內(nèi)的藥動學(xué)規(guī)律;采用GC-FID測定健康志愿者含服速效救心丸后吸收入血漿成分川芎嗪，機(jī)體生理和病理狀態(tài)分別給予復(fù)方川芎水提液在動脈血藥時曲線上川芎嗪的雙峰現(xiàn)象，對中藥復(fù)方體內(nèi)命運(yùn)的特殊處置規(guī)律，為臨床治療藥物監(jiān)測及證治藥動學(xué)假說的研究提供實驗依據(jù)。

3 分析與展望

3.1 生物堿藥代動力學(xué)研究方法較單一生物堿類的藥代動力學(xué)研究數(shù)量相對較少，研究方法較為單一，大部分以HPLC測定血藥濃度為主;由于生物堿進(jìn)入體內(nèi)含量低，血藥濃度很難檢測，這就需要更好的檢測技術(shù)的出現(xiàn)。生物測定法方面，由于中藥作用往往是多方面的，不同藥理效應(yīng)指標(biāo)測出的藥代動力學(xué)參數(shù)往往不同，某一藥理作用并不能代表全部藥理作用的體內(nèi)動態(tài)過程。因此，要采用多種方法、多指標(biāo)的研究相結(jié)合以得出更為準(zhǔn)確的結(jié)果。開展更深層次的生物堿藥動學(xué)-藥效學(xué)(PK-PD)模型，深入研究生物堿的體內(nèi)動力學(xué)和代謝情況，對指導(dǎo)生物堿類物質(zhì)的藥物篩選和結(jié)構(gòu)改造，從而尋找療效更好的藥物。

3.2 復(fù)方中生物堿藥代動力學(xué)研究較薄弱生物堿藥代動力學(xué)集中在單體研究，中藥復(fù)方中生物堿的藥代動力學(xué)研究顯得較為薄弱。隨著藥代動力學(xué)研究的深入，各相關(guān)交叉學(xué)科的發(fā)展，中藥復(fù)方藥代動力學(xué)研究對揭示復(fù)方藥效的物質(zhì)基礎(chǔ)、方劑組方原理及配伍規(guī)律、指導(dǎo)臨床合理用藥、促進(jìn)中藥的劑型改革和新藥研制，對中藥的現(xiàn)代化及國際化具有重要意義，必須進(jìn)一步加強(qiáng)中藥復(fù)方中生物堿藥代動力學(xué)研究。

3.3 生物堿毒性限制了其藥代動力學(xué)的研究生物堿結(jié)構(gòu)多樣，具有多種生理活性和明顯的藥理作用，部分生物堿既是生理活性物質(zhì)，也是毒性物質(zhì)。由于生物堿毒性給藥劑量、化學(xué)檢測方法靈敏度等問題，限制了其藥代動力學(xué)的研究。隨著色譜-質(zhì)譜聯(lián)用技術(shù)(LC-MS)、質(zhì)譜-質(zhì)譜聯(lián)用技術(shù)(MS-MS)、微透析-質(zhì)譜聯(lián)用技術(shù)等具有在線鑒別能力的定量技術(shù)，在體內(nèi)藥物分析中迅速推廣，為開展具有微量性、多樣性特點的中藥動力學(xué)的研究提供了技術(shù)保障，能夠豐富毒性生物堿藥物的藥代動力學(xué)研究。

綜上所述，生物堿是一類重要的天然化合物，目前國內(nèi)外對生物堿類化合物藥動學(xué)研究有一定的基礎(chǔ)，但對于含生物堿類成分的中藥復(fù)方制劑中動力學(xué)及代謝方面研究相對還很薄弱。因此， 有必要探索適宜中藥方劑的藥代動力學(xué)研究方法和模式，加強(qiáng)對生物堿代謝方面的研究，對代謝物的結(jié)構(gòu)、代謝途徑及藥理作用進(jìn)行更為深入的研究以闡明中藥生物堿發(fā)揮療效的真正物質(zhì)基礎(chǔ)，更好地指導(dǎo)臨床用藥和中藥新藥的研發(fā)。

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篇10

關(guān)鍵詞：SU系列藥物；人血清白蛋白；藥效

【中圖分類號】R129【文獻(xiàn)標(biāo)識碼】B【文章編號】1674-7526（2012）08-0321-01

人血清白蛋白是血漿中最主要的蛋白質(zhì)，能夠與大多數(shù)內(nèi)源性和外源性化合物如藥物等進(jìn)行可逆的結(jié)合從而起到在體內(nèi)的轉(zhuǎn)運(yùn)作用[1]。藥物與白蛋白的親合力大小直接影響到藥物在體內(nèi)的分布、清除以及到達(dá)靶點的藥物量而影響藥效。如果一個藥物在血漿中的蛋白鍵合率很高，會大大影響藥物的釋放，為了發(fā)揮其藥效就必須增加服用量，這樣除了費(fèi)用昂貴外，提高藥物劑量水平也必然會導(dǎo)致某些副作用產(chǎn)生[2]。過強(qiáng)的轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白鍵合能力，甚至可能阻礙藥物到達(dá)靶點位置。而與血清白蛋白親合力較小的藥物可能會具較低的劑量水平，且能提高其在體內(nèi)的耐受性，但過小的親合力又使轉(zhuǎn)運(yùn)攜帶的藥物量太小。掌握了關(guān)于白蛋白-配基鍵合的詳細(xì)結(jié)構(gòu)信息后，就可以在一定范圍內(nèi)，通過改變配基結(jié)構(gòu)使白蛋白和配基小分子的接觸減小，或只改變小分子的化學(xué)性質(zhì)而不干擾蛋白鍵合能力，即以適當(dāng)減少與HSA親合力為出發(fā)點設(shè)計化合物。

本章我們采用docking和分子動力學(xué)的方法對SU-118及其系列化合物與HSA的相互作用進(jìn)行研究和比較，對此系列降糖化合物結(jié)構(gòu)與HSA親合力的相關(guān)性進(jìn)行探討。

1實驗部分

用SU-118及其類似物進(jìn)行1N5U的ⅡA位置上的docking，進(jìn)行分子動力學(xué)模擬實驗，都采用cvff力場，選擇的系綜為正則系綜（NVT系綜），選定溫度為298K，自動調(diào)溫裝置的類型選的是Nose，每一步計算的時間為1fs，一共運(yùn)行600ps，最后得到平均勢能值分別為SU-114是-26808.865kcal/mol，而SU-118是-26991.364kcal/mol。只運(yùn)行單獨(dú)的小分子SU-114的勢能值為6.143kcal/mol，SU-118的勢能值為45.328kcal/mol，單模擬1N5U的勢能值為-27675.314kcal/mol。

其他同類藥物在ⅡA位置進(jìn)行了模擬：

2結(jié)果與討論

分子動力學(xué)結(jié)果得到的能量值，SU-114的為-26808865 kcal/mol，要比SU-118的-26991.364kcal/mol要大很多，去除有小分子引起的能量差異，SU-114 docking后的勢能比SU-118的高221.684kcal/mole，說明SU-114與HSA結(jié)合得不如SU-118與HSA結(jié)合的穩(wěn)定，另外從DockingScore也可以看出SU-118比SU-114結(jié)合得更加好。

SU-114是用疏水基團(tuán)-CH2CH（CH3）2取代-CH2C6H5，而疏水作用是穩(wěn)定復(fù)合物的重要因素，增加疏水基團(tuán)有利于藥物與白蛋白的鍵合。例如SU-117就是用疏水性較小的-CH2CH=CH2代替SU-118中的-CH2C6H5，SU-114與HSA結(jié)合得就比SU-117更加穩(wěn)定，從DockingScore就可以看出，SU-114得分比SU-117低。但是這里SU-118的模擬結(jié)果與這不符。

這里在討論藥物與HSA的鍵合時，沒有考慮靜電作用在藥物與HSA的相互作用中所起的重要作用。HSA含有許多堿性氨基酸，如組氨酸、精氨酸和N端氨基酸，在定義的ActiveSite pocket里就有幾個這類氨基酸，這些堿性基團(tuán)上的-NH3+ 顯正電性，所以HSA易于與陰離子化合物發(fā)生靜電作用[4]，增加鍵合能力。為了設(shè)計更為有效的藥物，我們建議應(yīng)兼顧疏水與靜電作用。另外藥物中的作用基團(tuán)，與HSA接觸時距離不同，對鍵合的影響程度也不同，緊靠HSA的位置顯得尤其重要，對它們的取代基改變會極大影響到與HSA的親合力。

所以可以知道疏水作用不是結(jié)合穩(wěn)定與否的唯一因素，雖然SU-114有疏水基團(tuán)，但它與HSA結(jié)合得沒有SU-118穩(wěn)定。而藥效SU-114比SU-118要弱，可見藥效是否明顯除與結(jié)合穩(wěn)定與否有關(guān)，還和其它因素有關(guān)，并非結(jié)合得越穩(wěn)定藥效越差，但也不能否定結(jié)合能力引起的影響。

通過一系列藥物分子在ⅡA位置docking與在ⅢA位置docking的結(jié)果對比，可以清楚地看出該系列藥物對ⅡA位置的親和力遠(yuǎn)比對ⅢA位置要強(qiáng)。

SU這一系列化合物主要以疏水作用與血清白蛋白鍵合，合適的疏水基團(tuán)，保證藥物在HSA上有適中的親合力，脲基上的取代基的親脂性也不能太大，否則親合力太大，會減少到達(dá)靶點的藥物量而影響藥效。所以增加一些極性取代基，適當(dāng)降低藥物與HSA親合力，以此為出發(fā)點進(jìn)行藥物設(shè)計，是以基于增加對靶分子親合力的化合物結(jié)構(gòu)設(shè)計方法的有效補(bǔ)充，為體外藥物篩選提供一個簡便的輔助手段。

參考文獻(xiàn)

[1]梁文權(quán)，生物藥劑學(xué)與藥物動力學(xué)，人民衛(wèi)生出版社，2000，82

[2]Vallner， J.J. J. Pharm. Sci.1977，447