血漿凝血指標(biāo)分析論文

時(shí)間:2022-03-07 02:46:00

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血漿凝血指標(biāo)分析論文

臨床上手術(shù)前要以APTT、PT和血小板計(jì)數(shù)三項(xiàng)項(xiàng)目檢查作為出血傾向的診斷指標(biāo)。我國(guó)在2000年衛(wèi)生部出臺(tái)凝血項(xiàng)目改革中指出,為了避免術(shù)中出血,手術(shù)前進(jìn)行出血傾向的檢查是非常必要的,由于影響止血的因素很多,但又不可能做許多實(shí)驗(yàn),因此,以往常規(guī)中用出血時(shí)間和凝血時(shí)間作為診斷指標(biāo),結(jié)果異常時(shí)再進(jìn)一步做較復(fù)雜的試驗(yàn)尋找病因。

近年來(lái)眾多文獻(xiàn)報(bào)道手工法APTT的參考值男性為31.5~43.5s,女性為32~43s。兩者差異無(wú)顯著性。受檢查的測(cè)定值較正常對(duì)照延長(zhǎng)超過(guò)10s以上才有病理意義。

手工法PT參考值為11~14s,超過(guò)正常對(duì)照3s為異常,PTR參考值為1±0.15。因儀器、試劑的不同,會(huì)得到不同的結(jié)果,因此儀器法很難規(guī)定統(tǒng)一的參考值,各實(shí)驗(yàn)室應(yīng)根據(jù)自己的儀器、試劑等條件,自行測(cè)定一批健康人,建立參考值。此后至少每年或條件有變化時(shí),根據(jù)新的條件,重新建立參考值。至少選擇40名18~55歲之間男性及非妊娠、月經(jīng)期女性(男女各半)身體健康,半月內(nèi)無(wú)服藥史,在平靜休息的狀態(tài)采血且分開(kāi)幾天采血和測(cè)定(以減少批間差異)。在常規(guī)檢測(cè)標(biāo)本的條件下進(jìn)行試驗(yàn)。

但由于FFP(frehfrozenplasma,F(xiàn)FP)仍是目前臨床預(yù)防和治療出、凝血功能障礙的重要血制品之一,因此,我們?yōu)榱私夂驼莆誇FP中血液凝血指標(biāo)的含量及活性對(duì)臨床具有重要意義,我們對(duì)湖南省永州市中心血站提供本院的FFP隨機(jī)抽查20份/袋/2U,進(jìn)行了部分凝血指標(biāo)的含量測(cè)定與分析,現(xiàn)將測(cè)定結(jié)果報(bào)告如下。

1資料與方法

1.1資料來(lái)源20份冷凍血漿均自血液采集后(于ACB-B抗凝全血分離放入-50℃速凍制備而成,保存于-30℃后備用)來(lái)自于本市中心血站。

1.2儀器設(shè)備(1)檢測(cè)儀器為SYSMEXCA-530型全自動(dòng)血凝分析儀,由日本東亞提供。(2)檢測(cè)儀器為BEcompactX全自動(dòng)血凝分析儀,由德國(guó)BE公司提供。(3)試劑由美國(guó)Dade-Behring公司生產(chǎn)提供。PT、APTT、TT、Fib試劑;(4)試劑由北京世帝科學(xué)儀器公司生產(chǎn)提供。PT、APTT、TT、Fib試劑;(5)質(zhì)控品由北京世帝科學(xué)儀器公司,批號(hào)為STG10504-6,有效期080801;美國(guó)Dade-Behring生產(chǎn)提供。批號(hào)為354-612X,有效期20090701。

1.3方法隨機(jī)分批抽取FFP20人份,37℃水浴融化,融化后立即在凈化工作室內(nèi)按無(wú)菌技術(shù)抽取血漿2ml,嚴(yán)格按照儀器和試劑說(shuō)明書(shū)要求,樣本測(cè)試:每天最多測(cè)試10例樣本,每例樣本可同時(shí)測(cè)試多個(gè)項(xiàng)目;同一樣本在兩臺(tái)儀器上的測(cè)定時(shí)間間隔<2h。每種分析物在每臺(tái)儀器上均重復(fù)測(cè)定2次,2次測(cè)定的順序完全顛倒。例如:某分析物當(dāng)天共有10個(gè)樣本,第1次測(cè)定順序?yàn)?、2、3、4、5、6、7、8、9和10號(hào),則第二次的測(cè)定順序必須為10、9、8、7、6、5、4、3、2、1,這樣可以消除交叉污染及在一批內(nèi)雙份測(cè)定結(jié)果均值的偏移;按直線回歸方程進(jìn)行數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì),計(jì)算相關(guān)系數(shù)。

隨即在已調(diào)好的CA530及德國(guó)BEcompactX自動(dòng)血凝分析儀上同時(shí)測(cè)定。對(duì)不同的檢測(cè)項(xiàng)目采用不同稀釋度標(biāo)準(zhǔn)血漿凝結(jié)時(shí)間與相應(yīng)的凝血因子活性率取對(duì)數(shù)后標(biāo)繪于對(duì)數(shù)圖上,再繪制成標(biāo)準(zhǔn)曲線。然后測(cè)定受檢者血漿凝結(jié)時(shí)間與相應(yīng)因子活性率所獲數(shù)據(jù)然后按內(nèi)插法帶入回歸方程,計(jì)算受檢者血漿中凝血因子活性水平。

2結(jié)果

測(cè)定項(xiàng)目PT、APTT、TT、Fib結(jié)果見(jiàn)表1。表1FFP凝血因子測(cè)定結(jié)果

3討論

因血漿中不穩(wěn)定的凝血因子(如FⅧ)其在體外半衰期較短,多為8~12h,其活性易喪失,加之血液離體后血漿凝血因子接觸異物表面會(huì)不同程度被激活而使之失活[1]。所以在FFP制備的同時(shí),應(yīng)盡量縮短FFP在室溫的停留時(shí)間,在制作采血標(biāo)簽時(shí),將即刻時(shí)間打印在標(biāo)簽上,以便在成分分離血漿時(shí),保證在6h內(nèi)把FFP放入-50℃冰箱中保存,速凍血漿是保存血漿內(nèi)各種有效蛋白成分及生物活性因子的重要條件[2]。

本資料凝血因子測(cè)定指標(biāo)有:PT(凝血酶原時(shí)間)試驗(yàn),采用國(guó)際標(biāo)準(zhǔn)化比值來(lái)表示;APTT(活性部分凝血酶原時(shí)間)試驗(yàn),是用于內(nèi)源性凝血因子Ⅷ、Ⅸ、Ⅺ活性異常的篩選;TT(凝血酶時(shí)間)試驗(yàn),是用于快速評(píng)定止血和血栓形成的有效方法,可以定量監(jiān)測(cè)功能性纖維蛋白原(Fbg)水平及因子含量的降低。

從本凝血指標(biāo)測(cè)定與分析中的各類血液凝血因子平均水平均在正常參考值范圍之內(nèi),說(shuō)明市中心血站在制備血漿過(guò)程中能嚴(yán)格執(zhí)行衛(wèi)生部技術(shù)規(guī)范要求,基本可達(dá)到臨床治療量的目的,有能保證對(duì)不穩(wěn)定因子的替代治療作用。但從本凝血指標(biāo)測(cè)定與分析中發(fā)現(xiàn)仍有少量血液凝血因子未能達(dá)到正常要求,如:APTT超出正常范圍(>35s)2例(10%),PT超出正常范圍(>14s)1例(5%),F(xiàn)ib低于正常范圍(<2g/L)11例(55%),從本凝血指標(biāo)測(cè)定與分析中的變化是否有待我們從血漿制備或血源質(zhì)量進(jìn)一步探討其原因。

目前,成分輸血在臨床醫(yī)學(xué)應(yīng)用廣泛,特別是針對(duì)無(wú)相應(yīng)的血液成分濃縮物可治療的疾病或多種凝血因子缺乏的患者,采用輸注FFP進(jìn)行治療,原因是FFP含有正常人血漿中大部分凝血因子,這是其他血液制品不能替代的。為確保FFP更有效準(zhǔn)確地對(duì)疾病進(jìn)行治療,我們對(duì)血站提供的FFP進(jìn)行抽查,一方面可以反饋信息,使中心血站在制備FFP時(shí)能嚴(yán)格從各個(gè)制備程序及環(huán)節(jié)上把關(guān),嚴(yán)把質(zhì)量控制;使FFP產(chǎn)品更好地為臨床治療服務(wù)。