導(dǎo)語：如何才能寫好一篇一句鼓勵(lì)的話，這就需要搜集整理更多的資料和文獻(xiàn)，歡迎閱讀由公務(wù)員之家整理的十篇范文，供你借鑒。

篇1

一句鼓勵(lì)的話語，或許可以使你擺脫困境，點(diǎn)燃希望；一句真誠(chéng)的鼓勵(lì)，也許會(huì)使你脫離迷惘，重塑新生。在我記憶的長(zhǎng)河中，永遠(yuǎn)也忘不了那個(gè)雨天、那句鼓勵(lì)的話語。

那是一個(gè)煙雨迷蒙的下午，中考成績(jī)下來了，看著那些因?yàn)轳R虎本不該錯(cuò)的題目，我一片茫然，心情惆悵，因?yàn)轳R虎是我一貫的毛病，為此您沒少下功夫，可我總也改不了，我拿著卷子，心情差到了極點(diǎn)，總想著回家后您是如何批評(píng)我，到了家門口我遲遲不敢敲門，好像心有感應(yīng)似地，您突然就開了門，看著我耷拉著腦袋、臉上一副難過的表情您就知道是怎么一回事兒了，可您還一如既往地歡迎我，等吃過了飯，我結(jié)結(jié)巴巴地告訴您我的事情，您先是沉默。沉默過后，您語重心長(zhǎng)地對(duì)我說：“孩子，你馬虎的毛病不是一次兩次了，您將來的愿望是考一所名牌大學(xué)，你若不改掉馬虎的毛病，怎能會(huì)實(shí)現(xiàn)你的愿望，況且以后你不管做什么事情，都不能有馬虎的習(xí)慣，以后你改了仍是媽媽的好孩子，‘沒有一番寒徹骨，那得梅花撲鼻香’。”我怔住了，媽媽并不是我所想象的火冒三丈，而是用了一句歌詞來鼓勵(lì)我，平時(shí)聽這首歌時(shí)，并沒有絲毫的感觸，而當(dāng)現(xiàn)在身臨其境時(shí)，竟然感慨萬千，竟然可以讓我感到一種如此強(qiáng)大的力量，媽媽的這句話在我心中生了根、發(fā)了芽，有朝一日長(zhǎng)成參天大樹。雨，依然在下，而此時(shí)我的心情早已不是低落，在此時(shí)我的心中，雨滴在地上，是它歡快的笑聲，絕無一絲半點(diǎn)凄涼之意。

“不經(jīng)一番寒徹骨，哪得梅花撲鼻香”，是?。〔唤?jīng)歷一番困難挫折，怎能獲得成功呢。

大地鼓勵(lì)了小草，因此它拔地而起；雨露鼓勵(lì)了小苗，因此它茁壯成長(zhǎng)；長(zhǎng)空鼓勵(lì)了雄鷹，因此它自由飛翔。母親鼓勵(lì)了我，讓我永遠(yuǎn)忘不了那個(gè)雨天、那句鼓勵(lì)的話。

六年級(jí):燕語

篇2

[關(guān)鍵詞]聚乙烯醇 固化微生物 生活污水

中圖分類號(hào)：X703 文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼：A 文章編號(hào)：1009-914X（2015）08-0312-01

0 引言：

在我國(guó)經(jīng)濟(jì)水平不斷增長(zhǎng)的今天，工業(yè)化進(jìn)程不斷加快，這在一定程度上危害了生態(tài)環(huán)境，促使水資源受到嚴(yán)重污染。我國(guó)政府為了實(shí)現(xiàn)可持續(xù)發(fā)展的宏偉目標(biāo)，近幾年在積極致力于污水處理中，為提高水資源利用率而努力。聚乙烯醇固定化微生物技術(shù)是處理生活污水的一種有效技術(shù)，聚乙烯醇無毒、價(jià)廉、抗微生物分解、機(jī)械強(qiáng)度高等優(yōu)點(diǎn)，使其適合應(yīng)用于生活污水處理中。當(dāng)然，實(shí)現(xiàn)聚乙烯醇固定化微生物技術(shù)有效的處理生活污水，需要制備有效的聚乙烯醇載體，促使聚乙烯醇固定化微生物技術(shù)可以充分發(fā)揮作用。對(duì)此，筆者在下文就聚乙烯醇固定化微生物技術(shù)對(duì)生活污水的處理進(jìn)行分析。

1 聚乙烯醇載體的制備

對(duì)于聚乙烯醇固定化微生物技術(shù)中聚乙烯醇載體的制備主要是通過交聯(lián)方法得到的。交聯(lián)是水溶性聚乙烯醇材料改性及制備聚乙烯醇載體的重要步驟。在聚乙烯醇載體制備中所應(yīng)用的教練方法有三種，即物理交聯(lián)、化學(xué)交聯(lián)、輻射交聯(lián)法。其中，輻射交聯(lián)法在不需要任何添加劑的作用就可以達(dá)到交聯(lián)的目的，但其在交聯(lián)的過程中可能具有殺菌和誘變的作用，不利用微生物載體的制備。所以，在固定化微生物載體制備中很少應(yīng)用到輻射交聯(lián)法。以下筆者就物理交聯(lián)和化學(xué)交聯(lián)這兩種方法進(jìn)行分析。

1.1 物理交聯(lián)

對(duì)聚乙烯醇進(jìn)行物理交聯(lián)處理中所采用的方法是冷凍解凍法。此種方法是利用聚乙烯醇鏈間的氫鍵、微晶區(qū)及大分子鏈間的纏結(jié)形成三維網(wǎng)絡(luò)，以此來增強(qiáng)聚乙烯醇與微生物的融合性，促使其可以在固定化微生物中存在，有效才處理生活污水中的污染物。對(duì)于冷凍解凍法的應(yīng)用，主要是將聚乙烯醇溶液放置在-20℃～-80℃低溫和室溫下反復(fù)進(jìn)行冷凍―解凍，促使聚乙烯醇材料內(nèi)部形成微晶區(qū)作為物理交聯(lián)點(diǎn)，在利用聚乙烯醇鏈間的氫鍵、大分子鏈間的纏結(jié)形成三維 網(wǎng)絡(luò)結(jié)構(gòu)，促使聚乙烯水凝膠強(qiáng)度增強(qiáng)，使其形成聚乙烯醇載體，并保證此載體具有開孔率高、含水率大等特點(diǎn)，在固定化微生物中作為載體而有效應(yīng)用。

1.2 化學(xué)交聯(lián)

相對(duì)于聚乙烯醇物理交聯(lián)法來說，化學(xué)交聯(lián)是更為有效的教練方法，其可以保證聚乙烯醇載體具有較強(qiáng)的水溶性、故穩(wěn)定性。因?yàn)?，化學(xué)交聯(lián)是由聚乙烯醇的羥基與多官能團(tuán)物質(zhì)進(jìn)行反應(yīng)形成交聯(lián)結(jié)構(gòu)的過程。在聚乙烯醇化學(xué)交聯(lián)中最常用的方法是聚乙烯醇―硼酸法，其可以使聚乙烯醇形成共價(jià)交聯(lián)的多孔凝膠，大大增強(qiáng)聚乙烯水凝膠強(qiáng)度，促使可以作為具有較強(qiáng)應(yīng)用性的固定化微生物載體。聚乙烯醇―硼酸法的應(yīng)是將聚乙烯醇材料與硼酸發(fā)生反應(yīng)，使聚乙烯醇形成單二醇型建，增強(qiáng)聚乙烯醇分子的鏈接，實(shí)現(xiàn)聚乙烯醇共價(jià)交聯(lián)，最終獲得聚乙烯水凝膠（如圖一所示）。利用聚乙烯醇―硼酸法來獲得聚乙烯醇載體，可以使所獲得的聚乙烯醇載體具有較強(qiáng)的機(jī)械強(qiáng)度、良好的彈性、較長(zhǎng)的使用壽命等優(yōu)點(diǎn)，這對(duì)于提高聚乙烯醇固定化微生物技術(shù)應(yīng)用性有很大作用。當(dāng)然，在利用此種方法來獲得聚乙烯醇載體，會(huì)使硼酸對(duì)某些微生物有毒害的作用，促使細(xì)胞活性降低，在使用的過程中應(yīng)當(dāng)慎重考慮這一點(diǎn)?？傮w上來講，聚乙烯醇―硼酸法是制備聚乙烯醇載體的一種非常有效的化學(xué)交聯(lián)法，值得廣泛的應(yīng)用。

2 聚乙烯醇固定化微生物技術(shù)對(duì)生活污水的處理研究

在我國(guó)經(jīng)濟(jì)有很大程度發(fā)展的今天，我國(guó)水污染日益嚴(yán)峻。我國(guó)要想實(shí)現(xiàn)可持續(xù)發(fā)展這一宏偉目標(biāo)，就需要加強(qiáng)水污染處理，盡可能的提高水資源利用。生活污水處理是解決水污染問題中的重要部分之一。相對(duì)于難降解、濃度高、含有重金屬的廢水來說，生活污水還是比較容易處理的。那么，以下就利用聚乙烯醇固定化微生物技術(shù)處理生活污水進(jìn)行分析。

2.1 含氮生活污水的處理

以往對(duì)于含氮廢水的處理，主要是利用好氧硝化和厭氧硝化兩個(gè)過程來完成的。但由于這兩個(gè)過程對(duì)時(shí)間和溶解氧條件要求較高，使得含氮廢水處理效果并不是非常好。在聚乙烯醇固定化微生物技術(shù)可以有效應(yīng)用的今天，利用此種方法來處理含氮廢水，可以大大提高含氮廢水處理效果。在含氮廢水處理方面，所應(yīng)用的聚乙烯醇固定化微生物技術(shù)是其可以同時(shí)固定自養(yǎng)好氧的硝化菌和異養(yǎng)厭氧的反硝化菌，通過載體內(nèi)部的溶解氧梯度形成外部好氧內(nèi)部厭氧的環(huán)境，實(shí)現(xiàn)在好氧反應(yīng)器內(nèi)的同時(shí)硝化反硝化脫氮。利用聚乙烯醇固定化微生物技術(shù)來處理含氮廢水，可以有效的脫氮，促使含氮廢水得到有效處理，這充分的說明此種技術(shù)在生活污水處理方面有很大作用。

2.2 污染物降解處理

利用聚乙烯醇固定化微生物技術(shù)來處理生活污水，主要是對(duì)活性污泥予以有效的處理，促使水變得清澈、干凈。在對(duì)生活污水中污染物降解處理過程中，所采用的處理方法主要是聚乙烯醇-硼酸法。此種方法的有效應(yīng)用，可以在污染物固定化后，活性污泥對(duì)溫度和pH值的適應(yīng)范圍變寬；在優(yōu)選條件下連續(xù)運(yùn)行，盡可能的被去除，從而達(dá)到處理生活污水的目的。聚乙烯醇-硼酸法處理生活污水的主要內(nèi)容是以聚乙烯醇（PVA）為包埋材料，以含2%的飽和硼酸作為交聯(lián)劑，采用包埋和交聯(lián)聯(lián)合應(yīng)用的微生物固定化方法固定馴化后的活性污泥，以網(wǎng)格塑料片作為支撐體，制備成固定化生物膜。生物膜活性恢復(fù)后，組裝固定化微生物反應(yīng)器，對(duì)生活污水進(jìn)行處理?？傊垡蚁┐脊潭ɑ⑸锛夹g(shù)的有效應(yīng)用可以對(duì)生活污水予以有效的處理，促使生活污水可以再次被應(yīng)用，這將大大提高水資源利用率，緩解日益匱乏的水資源，為促進(jìn)我國(guó)實(shí)現(xiàn)可持續(xù)發(fā)展創(chuàng)造條件。

3 結(jié)束語

聚乙烯醇固定化微生物技術(shù)是處理生活污水的一種有效技術(shù)，聚乙烯醇無毒、價(jià)廉、抗微生物分解、機(jī)械強(qiáng)度高等優(yōu)點(diǎn)，使其適合應(yīng)用于生活污水處理中。在對(duì)生活污水予以處理的過程中所應(yīng)用的聚乙烯醇固定化微生物技術(shù)，應(yīng)當(dāng)根據(jù)生活污水污染物情況，科學(xué)合理的應(yīng)用此技術(shù)來處理，這可以充分發(fā)揮聚乙烯醇載體的作用，促使生活污水得到有效的處理。相信隨著科學(xué)技術(shù)的不斷發(fā)展，聚乙烯醇固定化微生物技術(shù)將得到創(chuàng)新和發(fā)展，更加有效的應(yīng)用與生活污水處理中，高質(zhì)高效的完成生活污水處理，促使水資源利用率得以提高，為實(shí)現(xiàn)我國(guó)可持續(xù)發(fā)展創(chuàng)造條件。

參考文獻(xiàn)：

[1] 祝麗思.聚乙烯醇固定化微生物技術(shù)對(duì)生活污水脫氮的研究[J].黑龍江畜牧獸醫(yī)，2014（11）.

[2] 劉海琴，韓士群，李國(guó)鋒.固定化復(fù)合微生物對(duì)廢水的脫氮效果[J].江蘇農(nóng)業(yè)科學(xué)，2006（06）.

[3] 劉茹，索虎勤，李明，席鳳霞，何化平.三門峽城市供水安全現(xiàn)狀分析及評(píng)價(jià)[A].第三屆全國(guó)河道治理與生態(tài)修復(fù)技術(shù)交流研討會(huì)?？痆C].2011.

[4] 黃龍，韓春元，田娟，劉杰.不同處理能力人工濕地凈化效果的比較[A].四川省環(huán)境科學(xué)學(xué)會(huì)二一一年學(xué)術(shù)年會(huì)論文集[C].2011.

篇3

關(guān)鍵詞：固定化；漢遜德巴利酵母；3-羥基丙酸

中圖分類號(hào)：TQ926 文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼：A 文章編號(hào)：0439-8114（2017）04-0722-05

3-羥基丙酸（3-hp）是一種三碳無手性化合物，是大部分光學(xué)物質(zhì)的前體[1]，能夠發(fā)生氧化還原反應(yīng)得到1，3-丙二醇、丙二酸、丙烯酸等化合物[2]，這些化合物對(duì)于制備粘膠劑、纖維、塑料、樹脂、個(gè)人護(hù)理用品、水處理藥劑等必不可少；3-hp也可以聚合生成聚3-hp，具有強(qiáng)度高、易拉伸、生物降解性好等優(yōu)點(diǎn)，在環(huán)境保護(hù)、化學(xué)防護(hù)等方面具有廣泛的應(yīng)用前景，被譽(yù)為21世紀(jì)新興平臺(tái)化合物[3]。然而3-hp每年產(chǎn)量都不足，存在巨大的市場(chǎng)缺口，加之其重大的應(yīng)用價(jià)值和潛在的開發(fā)價(jià)值，吸引國(guó)內(nèi)外研究機(jī)構(gòu)爭(zhēng)先展開深入的研究。

微生物生產(chǎn)3-hp可以避免化學(xué)合成法帶來的諸多不良因素，具有生產(chǎn)時(shí)間短、材料容易得到、對(duì)環(huán)境無害、成本低等優(yōu)勢(shì)。1982年長(zhǎng)谷川等發(fā)現(xiàn)皺褶假絲酵母可用于發(fā)酵生產(chǎn)3-hp。但是微生物自身存在不穩(wěn)定、對(duì)環(huán)境敏感、易死亡、不可再生等缺點(diǎn)。如果引入固定化細(xì)胞技術(shù)則可以克服這些缺點(diǎn)。固定化細(xì)胞技術(shù)是指將細(xì)胞用物理或化學(xué)方法限制或定位在某一特定空間，保留其原有的活性，能被重復(fù)和連續(xù)使用的技術(shù)手段[4]，具有高穩(wěn)定性、簡(jiǎn)便、連續(xù)化使用、易控制等優(yōu)點(diǎn)，可提高產(chǎn)物的純度和過程效率[5，6]。其中包埋法是最常用的微生物固定化方法[7]，而聚乙烯醇、海藻酸鈉等有機(jī)高分子則可以作為良好的包埋載體材料[8]。

本研究采用經(jīng)實(shí)驗(yàn)室保存并培養(yǎng)的漢遜德巴利酵母，利用聚乙烯醇和海藻酸鈉聯(lián)合進(jìn)行固定化培養(yǎng)，確定聚乙烯醇、海藻酸鈉、氯化鈣濃度等研究固定化條件，為后續(xù)的研究提供技術(shù)參考。

1 材料與方法

1.1 材料、試劑與培養(yǎng)基

1）菌種。漢遜德巴利酵母，實(shí)驗(yàn)室保存。

2）劑。海藻酸鈉、乙醇、硫酸、苯酚等均為分析純。

3）培養(yǎng)基。種子培養(yǎng)基：葡萄糖20 g/L，蛋白胨20 g/L，酵母膏10 g/L，瓊脂粉20 g/L，丙酸10 mL。發(fā)酵培養(yǎng)基：葡糖糖30 g/L，酵母膏10 g/L，（NH4）2SO4 10 g/L，KH2PO4 5 g/L，K2HPO4 2 g/L，MgSO4?7H2O 1 g/L，F(xiàn)eSO4?7H2O 0.03 g/L，丙酸10 mL，調(diào)節(jié)pH至6.0。

4）主要儀器設(shè)備。FA21040電子天平，北京精密儀器公司；IXQ-SG46-280A手提式壓力蒸汽滅菌鍋，上海博訊有限公司；HZ150L恒溫培養(yǎng)搖床，武漢瑞華儀器設(shè)備有限責(zé)任公司；250D恒溫光照培養(yǎng)箱，常州國(guó)華電器有限公司；DL-5低速大容量離心機(jī)，上海安亭儀器廠；高效液相色譜儀，大連依利特分析儀器有限公司。

1.2 方法

1.2.1 漢遜德巴利酵母的培養(yǎng) 漢遜德巴利酵母的固體培養(yǎng)；采用本實(shí)驗(yàn)室斜面保存的漢遜德巴利酵母（Debaryomyces hansenii），經(jīng)中國(guó)微生物菌種保藏管理委員會(huì)普通微生物中心鑒定，保藏號(hào)為CGMCC No.11893。種子培養(yǎng)基，31 ℃恒溫培養(yǎng)3 d。漢遜德巴利酵母的液體培養(yǎng)：采用長(zhǎng)勢(shì)較好的漢遜德巴利酵母菌進(jìn)行液體培養(yǎng)，31 ℃、150 r/min搖床培養(yǎng)3 d，發(fā)酵液沉淀過濾后用于3-羥基丙酸測(cè)定。

1.2.2 固定化小球的制備 將漢遜德巴利酵母液體發(fā)酵液靜置0.5 h，過濾后菌體沉淀加入到一定濃度海藻酸鈉與聚乙烯醇混合膠體中混勻，菌膠比2∶1。用5號(hào)針筒吸取混合液滴入一定濃度的CaCl2溶液中制成固定化小球，粒徑約0.3～0.5 cm，常溫下固定2 h，4 ℃冰箱固定2 h。小球用無菌水沖洗2～3遍后放入液體培養(yǎng)基，31 ℃、150 r/min搖床培養(yǎng)3 d。

1）聚乙烯醇濃度的確定。分別以8.0%、9.0%、10.0%、11.0%、12.0%的聚乙烯醇在1.0%海藻酸鈉和2.1%氯化鈣的條件下，固定漢遜德巴利酵母，按固定化小球2個(gè)/mL培養(yǎng)基接種，100 mL培養(yǎng)基/250 mL三角瓶，31 ℃、150 r/min培養(yǎng)3 d，測(cè)定3-羥基丙酸含量。

2）海藻酸鈉濃度的確定。分別以0.8%、0.9%、1.0%、1.1%、1.2%的海藻酸鈉在10.0%的聚乙烯醇和2.1%的氯化鈣的條件下，固定漢遜德巴利酵母，按固定化小球2個(gè)/mL培養(yǎng)基接種，100 mL培養(yǎng)基/250 mL三角瓶，31 ℃、150 r/min培養(yǎng)3 d，測(cè)定3-羥基丙酸含量。

3）氯化鈣濃度的確定。分別以1.7%、1.9%、2.1%、2.3%、2.5%的氯化鈣在1.0%的海藻酸鈉和10.0%的聚乙烯醇的條件下，固定漢遜德巴利酵母，按固定化小球2個(gè)/mL培養(yǎng)基接種，100 mL培養(yǎng)基/250 mL三角瓶，31 ℃、150 r/min培養(yǎng)3 d，測(cè)定3-羥基丙酸含量。

1.2.3 3-羥基丙酸的測(cè)定 3-羥基丙酸的方法：采用高效液相色譜法，3-羥基丙酸在210 nm有吸收峰，紫外檢測(cè)器210 nm；色譜柱規(guī)格：迪馬C18 250×4.6 mm，5 μm；pH范圍為1.5～9.0；流動(dòng)相：3%甲醇-97%水；柱溫：35 ℃；流速為0.8 mL/min；進(jìn)樣量為20 μL，檢測(cè)3-羥基丙酸含量

1）3-羥基丙酸標(biāo)準(zhǔn)曲線繪制。配置濃度梯度為2.00、4.00、6.00、8.00、10.00 g/L的3-羥基丙酸標(biāo)準(zhǔn)工作液，靜置過夜后檢測(cè)。

2）樣品中3-羥基丙酸的測(cè)定。取固定化漢遜德巴利酵母的培養(yǎng)液經(jīng)4 000 r/min離心5 min，用0.22 μm濾膜過濾后檢測(cè)3-羥基丙酸的含量。

1.2.4 數(shù)據(jù)分析 采用Origin 8.1軟件對(duì)數(shù)據(jù)進(jìn)行作圖和統(tǒng)計(jì)分析，所有數(shù)據(jù)用平均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差（x±s）表示。

2 結(jié)果與分析

2.1 高效液相色譜條件的確定

由于底物丙酸、發(fā)酵產(chǎn)物3-羥基丙酸以及可能產(chǎn)生的同分異構(gòu)體乳酸都為有機(jī)弱酸，易電離，pH大都在2～3。試驗(yàn)表明，隨著流動(dòng)相pH逐漸增高樣品的分離度越低，然而低pH對(duì)色譜柱有較大損傷，結(jié)合色譜柱自身pH范圍，確定流動(dòng)相pH為2.0。甲醇所占比例越高分離度越低，由此選擇pH 2.0含有3%甲醇的流動(dòng)相。

2.2 3-羥基丙酸標(biāo)準(zhǔn)曲線

根據(jù)峰面積與濃度之間的關(guān)系求得直線方程。由圖1可知，3-羥基丙酸的出峰時(shí)間為5.6 min左右。圖2為根據(jù)峰面積繪制的標(biāo)準(zhǔn)曲線，得一元線性方程y=75.324x-18.625，經(jīng)顯著性檢驗(yàn)，R2=0.999 0，說明3-羥基丙酸含量與峰面積之間具有極顯著的線性關(guān)系。

2.3 固定化小球的制備

2.3.1 高效液相色譜條件的確定 通過試驗(yàn)可知，隨著流動(dòng)相的pH逐漸增高樣品的分離度越低，流動(dòng)相中甲醇所占比列越高分離度越低，由此選擇pH 2.0含有3%甲醇的流動(dòng)相。

2.3.2 聚乙烯醇濃度對(duì)固定化小球形態(tài)的影響 分別采用8.0%、9.0%、10.0%、11.0%、12.0%聚乙烯醇和1.0%海藻酸鈉制備固定化小球。從圖3、表1中可以看出，當(dāng)聚乙烯醇濃度低于9.0%時(shí)，固定化小球硬度很軟；當(dāng)聚乙烯醇濃度高于11.0%時(shí)，固定化小球硬度很硬；當(dāng)聚乙烯醇濃度在9.0%～10%時(shí)，固定化小球透明度適中，硬度適中，呈球形，尾巴不明顯。因此初步選擇聚乙烯醇濃度為9.0%～11.0%。

2.3.3 海藻酸鈉濃度對(duì)固定化小球形態(tài)的影響 分別采用0.8%、0.9%、1.0%、1.1%、1.2%海藻酸鈉和10.0%聚乙烯醇制備固定化小球。從圖4、表2中可以看出，當(dāng)海藻酸鈉濃度低于0.9%時(shí)，固定化小球硬度很軟；當(dāng)海藻酸鈉濃度高于1.1%時(shí)，固定化小球硬度很硬；當(dāng)海藻酸鈉濃度在0.9%～1.1%時(shí)，固定化小球透明度適中，硬度適中，呈球形，尾巴不明顯。因此初步選擇海藻酸鈉濃度范圍為0.9%～1.1%。

2.3.4 氯化鈣濃度對(duì)固定化小球形態(tài)的影響 采用1.0%海藻酸鈉和10.0%聚乙烯醇混合在1.7%、1.9%、2.1%、2.3%、2.5%氯化鈣的條件下制備固定化小球。從圖5、表3中可以看出，當(dāng)氯化鈣濃度低于1.9%時(shí)，固定化小球硬度很軟；當(dāng)氯化鈣濃度高于2.3%時(shí)，固定化小球硬度很硬；當(dāng)氯化鈣濃度在1.9%～2.3%時(shí)，固定化小球透明度適中，硬度適中，呈球形，尾巴不明顯。因此初步選擇氯化鈣濃度范圍為1.9%～2.3%。

2.4 固定化細(xì)胞發(fā)酵液3-羥基丙酸的測(cè)定

由圖1可知，3-羥基丙酸的出峰時(shí)間為5.6 min，圖6中5.6 min也有峰出現(xiàn)，3-羥基丙酸含量為4.55 g/L。

2.5 不同聚乙烯醇濃度下3-羥基丙酸含量

根據(jù)初步試驗(yàn)可知，在其他相同條件下，聚乙烯醇濃度為9.0%、10.0%、11.0%時(shí)制備固定化小球， 31 ℃培養(yǎng)3 d，測(cè)定3-羥基丙酸的含量（圖7）。從圖7可以看出，3-羥基丙酸隨著聚乙烯醇濃度的增加，先增加后減少，10.0%的聚乙烯醇為最佳濃度，此時(shí)3-羥基丙酸的含量為（20.01±0.66） g/L。

2.6 不同海藻酸鈉濃度下3-羥基丙酸含量

根據(jù)初步試驗(yàn)可知，在其他相同l件下，海藻酸鈉濃度為0.9%、1.0%、1.1%時(shí)制備固定化小球，31 ℃培養(yǎng)3 d，測(cè)定3-羥基丙酸的含量。從圖8可以看出，3-羥基丙酸的含量隨著海藻酸鈉濃度的增加先增加后減少，1.0%海藻酸鈉為最佳濃度，此時(shí)3-羥基丙酸的含量為（18.71±0.54） g/L。

2.7 不同氯化鈣濃度下3-羥基丙酸含量

根據(jù)初步試驗(yàn)可知，在其他相同條件下，氯化鈣濃度為1.9%、2.1%、2.3%時(shí)制備固定化小球，31 ℃培養(yǎng)3 d，測(cè)定3-羥基丙酸的含量。從圖9可以看出，3-羥基丙酸的含量隨著氯化鈣濃度的增加先增加后減少，2.1%的氯化鈣為最佳濃度，此時(shí)3-羥基丙酸的含量為（18.37±0.45） g/L。

2.8 最佳固定化條件

固定化漢遜德巴利酵母的最佳工藝為聚乙烯醇的濃度10.0%；海藻酸鈉的濃度1.0%；氯化鈣濃度2.1%。在此條件下3-羥基丙酸含量為（21.53±1.12） g/L，未固定化漢遜德巴利酵母3-羥基丙酸含量為（18.34±0.89） g/L，固定化后3-羥基丙酸含量提高了17.39%。

3 小結(jié)與討論

1）聚乙烯醇和海藻酸鈉聯(lián)合固定化漢遜德巴利酵母的特點(diǎn)。聚乙烯醇需要先冷水溶脹，再熱水溶解用于制備，充分的溶脹可以使形成的固定化小球更牢固，同時(shí)聚乙烯醇自身進(jìn)行交聯(lián)后，可以減少在水中的溶解；由于產(chǎn)物3-羥基丙酸是有機(jī)酸，加入聚乙烯醇能提高載體的成球性，保護(hù)載體，且聚乙烯醇較海藻酸鈉強(qiáng)度更高，因此聚乙烯醇含量（10%）遠(yuǎn)高于海藻酸鈉含量（1.0%），可以保證固定化小球的穩(wěn)定性；經(jīng)過多次重復(fù)試驗(yàn)，證實(shí)聯(lián)合固定化漢遜德巴利酵母在培養(yǎng)階段未發(fā)生破裂與溶解現(xiàn)象，固定化小球形態(tài)沒有明顯變化。

2）固定化漢遜德巴利酵母較未固定化細(xì)胞的優(yōu)勢(shì)。目前國(guó)內(nèi)外主要通過菌種誘變、基因重組方式獲得高產(chǎn)3-羥基丙酸的菌株，本研究采用固定化工藝固定漢遜德巴利酵母，較未固定化細(xì)胞產(chǎn)3-羥基丙酸能力也有一定的提升。與未固定細(xì)胞相比，固定化工藝主要的優(yōu)勢(shì)包括：①按菌膠比為2∶1和2個(gè)固定化小球/mL培養(yǎng)基接種，菌種密度和固定化小球數(shù)量都較高，成功獲得了較高的3-羥基丙酸含量；②固定化工藝采用制備微膠囊小球，由于體積小，比表面積大，用于發(fā)酵培養(yǎng)時(shí)，增加了培養(yǎng)基與小球的接觸面積，更有利于菌種繁殖和生產(chǎn)3-羥基丙酸；③固定化小球可以重復(fù)利用，無需反復(fù)接種，尤其是固定化細(xì)胞在反復(fù)使用過程中，菌種保持較高繁殖能力，生長(zhǎng)延遲期很短，節(jié)省了生產(chǎn)3-羥基丙酸的時(shí)間。

3）從固定化小球形態(tài)學(xué)判斷，較適聚乙烯醇濃度范圍是9.0%～11.0%，較適海藻酸鈉濃度范圍是0.9%～1.1%，較適氯化鈣濃度范圍是1.9%～2.3%，固定化小球透明度適中，硬度適中，成球形無拖尾。采用高效液相色譜測(cè)定3-羥基丙酸含量，確定聚乙烯醇和海藻酸鈉聯(lián)合固定漢遜德巴利酵母最佳工藝為10.0%聚乙烯醇，1.0%海藻酸鈉，2.1%氯化鈣。在此條件下3-羥基丙酸含量為（21.53±1.12） g/L，較未固定化漢遜德巴利酵母3-羥基丙酸含量提高了17.39%。

參考文獻(xiàn)：

[1] 溫麗瑗，陳小平，郎春燕.3-羥基丙酸合成途徑研究進(jìn)展[J].天然氣化工（C1化學(xué)與化工），2012（4）：62-67.

[2] JIANG X L，MENG X，XIAN M. Biosynthetic pathways for 3-hydroxypropionic acid Production[J].Applied Microbiology and Biotechnology，2009，82（6）：995-1003.

[3] 程 ，羅 暉，常雁紅，等.微生物產(chǎn)3-羥基丙酸研究進(jìn)展[J].化學(xué)與生物工程，2012，29（11）：9-12.

[4] 朱啟忠，張玉波.微生物固定化技術(shù)與污水處理[J].資源開發(fā)與市場(chǎng)，2010（7）：585-588.

[5] 何 h，林慶勝，郝衛(wèi)寧，等.生物固定化技術(shù)及其應(yīng)用研究進(jìn)展[J].生物技術(shù)通報(bào)，2009（S1）：88-93.

[6] 申婷婷，李小明，岳 秀，等.微生物固定化技術(shù)的研究與應(yīng)用[J].廣州化工，2011（20）：3-13.

篇4

鼓勵(lì)給人的力量是巨大的，是永久的，是不可磨滅的，如果在一個(gè)人遭受巨大的挫折時(shí)，將要放棄生命時(shí)，你送給他（她）一句鼓勵(lì)的話，你就可挽救一個(gè)人的生命。

在成長(zhǎng)中，我曾親身體驗(yàn)過一句鼓勵(lì)的話的巨大力量。那是在我的前一段日子里，我因在初中的學(xué)習(xí)生活中，成績(jī)不理想，原本小學(xué)成績(jī)優(yōu)異的我，現(xiàn)在，在學(xué)校中已算不上什么好學(xué)生了，而想過輕生，母親知道后，給了我一句鼓勵(lì)，說：“這沒有什么，初中你也一定會(huì)學(xué)好，這才是開始。”雖然這句話異常平淡，但它使我那當(dāng)時(shí)沖動(dòng)的表現(xiàn)，頓時(shí)消除了一半。這足以見鼓勵(lì)的力量，鼓勵(lì)在成長(zhǎng)中是不可缺少的。

成長(zhǎng)——它是步入人生最美麗的時(shí)節(jié)，咀嚼人生內(nèi)涵，品味人生的時(shí)候，懂得人生艱難的時(shí)代，所以在成長(zhǎng)中，更需要鼓勵(lì)。

篇5

黑格爾在《生命的哲學(xué)》里講述了這樣一則故事：一個(gè)被執(zhí)行死刑的青年在赴刑場(chǎng)時(shí)，圍觀人群中有一個(gè)老太太突然冒出一句：“看，他那金色的頭發(fā)多么漂亮迷人！”那個(gè)即將告別人世的青年聞聽此言，朝那老太太站的方向深深地鞠了一躬，含著淚大聲說：“如果周圍多一些像您這樣的人，我也許不會(huì)有今天。”

還有一個(gè)類似的故事：一個(gè)年輕人，他對(duì)生活已完全喪失了信心，準(zhǔn)備割腕自殺。臨死前，他搜空所有的記憶想找一個(gè)能讓自己活下來的理由，但他所能記起的都是些傷心事。絕望之時(shí)，他腦海中突然閃現(xiàn)出一件事：小學(xué)時(shí)的一次寫生課上，他畫了一棵樹，綠色的枝干，綠色的樹葉。老師從他身后走過，說了一句：“多么有創(chuàng)意?。?rdquo;正是這一句模棱兩可的話讓他又重新燃起了生的希望。

假如一個(gè)人老是生活在別人的指責(zé)、輕視、鄙夷中，往往會(huì)自甘平庸，甚至心靈變態(tài)，仇視他人和社會(huì)。而一句飽含愛心的善意的激勵(lì)，則可能引導(dǎo)他走向人生正途。

一句贊美的話也許會(huì)改變一個(gè)人的一生，只可惜現(xiàn)實(shí)生活中我們往往過于吝嗇，不肯輕易吐露自己的贊美之言，卻容易在不經(jīng)意間傷害別人。第一個(gè)年輕人之所以走到那一步，或許就在于此吧。如果大家都像那位老太太一樣，多一份愛心，在別人沮喪失落之時(shí)，送一句鼓勵(lì)或贊美的話，讓他感到陽光的溫暖，讓他知道在茫茫人海中他不是孤獨(dú)的，一直有人在關(guān)注著他，與他同行，悲劇可能就會(huì)避免。

篇6

昨天（5月8日）是母親節(jié)，但是我這個(gè)“不孝之子”卻沒有對(duì)含辛茹苦養(yǎng)育我十四個(gè)春秋的母親說上一句感恩和祝福的話，反而還惹哭了母親，在此，我要向我的母親說聲：對(duì)不起！

昨天上午，母親在臥室里修理化妝盒聲音很大，正在客廳里準(zhǔn)備期中考試的我聽后覺得心煩、刺耳，一股無名的“憤怒”涌上來，我直沖到母親臥室里，與母親爭(zhēng)吵了起來，隨手拿起化妝盒向門口扔去，在化妝盒落地的一瞬間，我突然覺得我犯下了不可饒恕的罪過，母親每天對(duì)我的生活、學(xué)習(xí)照顧得無微不至，我怎么能這么對(duì)母親?？粗に榱说幕瘖y盒，我知道母親的心也隨之碎了?？墒?，我仍裝作若無其事的樣子繼續(xù)回去學(xué)習(xí)，但我卻清晰地聽到一位倔強(qiáng)堅(jiān)強(qiáng)的母親第一次的哭聲，她哭得那么傷心、哭得那么委屈，我的心也碎了。

那一天母親與我一直都在冷戰(zhàn)，她不理睬我，漠視我，不關(guān)注我。我頓時(shí)感到了孤獨(dú)，終于體會(huì)到“沒媽的孩子像根草”的滋味和沒有母親在身邊真活不下去的感覺。

下午去補(bǔ)課，回家的路上我在花店買了束“忘憂草”，在出租車上聽著以母親節(jié)為話題的節(jié)目，淚水伴著從收音機(jī)中傳出來的歌聲流了下來?；氐郊?，我把花插到花瓶中放在客廳，但愿母親起床后能夠看到兒子對(duì)她的歉意。

今天早上，一切又像往常那樣，好像什么都沒發(fā)生過，母親仍然親自把一杯加了溫的牛奶放在我的面前，此刻，我的眼淚簌簌地流了下來，我被母親的寬容和理解所感動(dòng)。出門時(shí)，母親還祝福我“考試時(shí)認(rèn)真審題”并說了一句“祝兒子考試成功！”我的心為之一振，突然感到從沒有過的放松。

篇7

而，就是那么一句話，讓我樂觀，讓我對(duì)生活充滿希望。

我是奶奶一手拉扯長(zhǎng)大的，我倒也從不在乎奶奶知不知道我，冷不冷、熱不熱、餓不餓、飽不飽，在乎的是奶奶那一句“不要怕”，就是那一句“不要怕”使我學(xué)會(huì)了活著所需要的，平靜與堅(jiān)韌。

奶奶是個(gè)沉默寡言的人，在我的印象中她沒有留給我太多的話。印象最深的還是那一句“不要怕”。它幾乎是奶奶留給我唯一的“財(cái)富”它對(duì)于我來說也是無比珍貴的。

我六歲那年，奶奶帶我到一個(gè)叫“大壩”的地方去，那里有一座高高的“木板橋”我很想到對(duì)岸去，但又很害怕，畢竟那橋下面的河水深得不見底，我有些躊躇不前，回頭望望奶奶，奶奶站在橋的階梯上望著我說：“不要怕”奶奶的聲音不大，對(duì)我來說卻像隆隆的雷聲，我便壯起膽走過去，一直走過去……等我走到對(duì)岸，回頭看奶奶，奶奶站在寒風(fēng)中朝我微笑，那時(shí)，我沒有說話，因?yàn)槲蚁嘈盼疫€會(huì)走回去的。

9歲那年我生了一種很嚴(yán)重的病，右手關(guān)節(jié)上長(zhǎng)了一個(gè)很大的腫塊。在那期間，奶奶每天帶我穿梭于家與醫(yī)院的路上，幾乎每天都過著兩點(diǎn)一線的生活，而手上的腫塊卻未見消除反而更加痛了，奶奶那天將我的衣服收拾好對(duì)我說要帶我去市醫(yī)院看病，我走到家門口坐到門口的臺(tái)階想：“我是不是不會(huì)好起來了”，我沒有哭，只感覺手腳都是冰涼的，看著太陽一寸一寸落下，天黑了，四周都被黑暗吞沒了，風(fēng)也越吹越大，我打了一個(gè)寒顫，奶奶走過來，坐到我身旁，又說了一句‘不要怕”。我再也克制不住了，撲到奶奶的懷了哭了起來，奶奶用她那雙悲憫又慈祥的眼睛望著我，用手撫摸著我的頭和肩說：“別怕，奶奶相信你會(huì)好起來的，堅(jiān)強(qiáng)點(diǎn)”。

月亮升起來了，慘白的一輪?？迚蛄?，我伏在奶奶的腿上，慢慢的睡著了……你不白斑病白斑病白斑病白斑病白斑病白斑病白斑病白斑病白斑病白斑病白斑病白斑病白斑病白斑病白斑病白斑病白斑病白斑病白斑病白斑病吧吧他

后來奶奶帶我去市醫(yī)院檢查在那呆了好幾天，天天都打吊水。病也不知不覺的好了。

篇8

颯颯秋風(fēng)迎來了金色的9月，教師節(jié)踏著輕盈的步子向我們緩緩走來。

老師，永遠(yuǎn)是最值得我們尊重和感恩的人。當(dāng)我們懵懂地進(jìn)入校園的時(shí)候，是老師給我們明確努力的方向；當(dāng)我們遇到困難的時(shí)候，是老師一句鼓勵(lì)的話，讓我們堅(jiān)定決心，鼓足勇氣；當(dāng)我們?nèi)〉贸煽?jī)時(shí)，是老師一句贊美的話，讓我們激動(dòng)不已，信心百倍；當(dāng)我們受到挫折時(shí)，是老師一個(gè)和藹的微笑，一句循循善誘的開導(dǎo)，讓我們找回了自信。老師用慈父慈母般的關(guān)愛和鼓勵(lì)，用不倦的教誨，引導(dǎo)我們駛向正確的航道……

在第二十五個(gè)在教師節(jié)來臨之際，大隊(duì)部向同學(xué)們發(fā)出倡議，希望同學(xué)們用自己真摯的心，表達(dá)對(duì)老師們的感激之情。

1、早上見到老師時(shí)送上一聲親切的問候；

2、給老師寫一封表露真情的親筆信，字字句句皆我心；

3、親手做一張賀卡、畫一張畫，送給老師，一切盡在不言中；

4、以全班同學(xué)的名義，在講臺(tái)上放一支鮮花或倒上一杯茶；

5、當(dāng)老師走進(jìn)教室時(shí)，能看到黑板上寫的祝教師節(jié)快樂的話；

6、一份自己決心改正缺點(diǎn)追求上進(jìn)的日程表……

篇9

當(dāng)我看到大家一字一句評(píng)點(diǎn)我的作文的時(shí)候，那一瞬間，我被感動(dòng)了…

一開始，我注冊(cè)小荷時(shí)，我就想了以后一定要好好寫好作文，小荷就是我的起跑線，但是，這條起跑線很特殊，因?yàn)?，它是沒有終點(diǎn)的，只會(huì)一直努力的跑下去。

我只是個(gè)普通的五年級(jí)的女孩子，寫得作文當(dāng)然還是有很多的不足之處，但是，我很感謝大家，感謝大家能每次認(rèn)認(rèn)真真的評(píng)點(diǎn)我的文章，并指出我的不足之處，我和感動(dòng)，甚至有些小荷同學(xué)，還專門發(fā)紙條給我，教我該怎么寫的更好，我真的好感動(dòng)，于是，我一字一句的都回給了他們，就這樣，我們之間成為了很好的朋友。

篇10

茸，我們也認(rèn)識(shí)了3年多了吧，在這些年里，我們有過快樂，有過傷心，有過吵鬧，有過決裂，可我卻覺得每一天都過得很快樂，因?yàn)橛心?，這真的是真心話。

當(dāng)我每一次穿上新衣服在你面前走來走去時(shí)，你總會(huì)說：“顯擺什么呀，就你有新衣服呀。”我真的無言以對(duì)了。

你說我為你系鞋帶讓你很感動(dòng)，難道你忘了嗎？你也為我系過啊，我看著你用潔白的雙手摸著我臟兮兮的鞋帶時(shí)我的眼被淚水濕潤(rùn)了，小小的心被你打動(dòng)了，我內(nèi)心發(fā)誓：我會(huì)把你當(dāng)做最好的伙伴，你有困難時(shí)，我一定不顧一切的幫你。